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(無題) 削除/引用 No.1284-3 - 2011/12/02 (金) 20:54:56 - 案ずるより そのキットでNF-kBがそのお餅みたいな沈殿画分にどれだけきているか？定量的にゲルでチェックしましたか？ 多くの場合（ヒストン系を除いて）、抽出効率は高いので問題にならないことが多いです。

(無題) 削除/引用 No.1284-2 - 2011/12/02 (金) 18:54:23 - TS ゲノムDNAが原因です。 容量がどのくらいあるか読み取れませんが、一定の容量があれば、シリンジを通すか、超音波でDNAを剪断するとさらさらになります。

核分画時の核タンパク抽出方法について 削除/引用 No.1284-1 - 2011/12/02 (金) 17:13:33 - おにぎりせんべい 目的タンパクの核内での量を見るために核分画をしてタンパクを抽出 する実験を行っています(目的タンパク：NF-kB)。 NE-PER Nuclear and Cytoplasmic EXxtraction Reagentsというキット を使って実験していますが、核タンパクを抽出するときに核ペレット がおもちみたいにどろっとした状態になっていてピペッティングや ボルテックスをやってもきちんと分散させることが出来ず、十分な量 のタンパクが抽出できません。 分散させるのに何かいい方法はないでしょうか？ また、分散させるのが無理ならRIPAバッファを使って核を溶かして しまって実験してみようかとも思っているのですがそれはだめでしょうか？ 初心者で、また勉強不足で申し訳ありませんが ご回答頂ける方がいましたらよろしくお願いします。

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