BioTechnicalフォーラム [RNA回収用の細胞保存]

RNA回収用の細胞保存

No.1212-TOPIC - 2011/11/15 (火) 18:25:31 - mag

タンパク質回収用のdish上の細胞をPBS wash 後にdishの液体をすべて吸引し、dishごと液体窒素で凍らせ、-80度にそのまま保存することができると思いますが、RNAを回収したい細胞も上記のような方法で保存しても大丈夫なのでしょうか？

普通はIsogen(Trizol)などに溶かした状態までもっていき保存すべきだと思っていたのですが。知り合いがそうやっているらしいのです。
　

- このトピックにメッセージを投稿する -

全8件 ( 1 ～ 8 )　前 | 次　1/ 1. /1

掲示板のトップの書き込みは読みましたか？

削除/引用

No.1212-8 - 2012/08/28 (火) 17:35:52 - ~

書き込みがかなり増えてしまいサーバーの負荷が大きくなったので、新しいBioTechnicalフォーラムに移行してください。
新しいトピックは新フォーラムでのみ立ち上げ可能です。レスは2012年1月14日までつけられますが、その後は、つけられません。

なぜか、まだレスがつけられますが、見ている人はほとんどいません。

RNA回収用のdish上の細胞

削除/引用

No.1212-7 - 2012/08/28 (火) 15:15:16 - RNA

RNA回収用のdish上の細胞をトリプシンEDTAで回収後、ペレットで-80度にそのまま保存することができると思いますが、セルライセートにして保存した場合と比較して差がでるか比較した方いらっしゃいますか？いずれにしても比較して行う予定でいますが、参考までに質問させてもらいます。

(無題)

削除/引用

No.1212-6 - 2011/11/18 (金) 10:14:47 - KY

dishの液体窒素での急凍結を省略して、-80度に入れるだけの人がいるのですが、これはRNAの保存ではアウトですかね？
一応リアルタイムPCRはできているのですが、サンプル間のブレがあるような、実験が下手な人だからなのかわかりません。

(無題)

削除/引用

No.1212-5 - 2011/11/18 (金) 09:03:37 - ~

>[Re:4] もうせさんは書きました :
> どちらの方法も使うことがありますが、TrizolやRNAlaterで保存するのと-80で保存しておくのはどちらがいいのでしょうか？

どちらもその後の操作が適切に行なわれれば、違いの検出は困難だと思います。
ただ、-80℃保存の場合は溶かす際にも手際が求められるでしょうし、ラボのメンバーが長時間フリーザーを開けてサンプルを探したりすると溶けてしまうかもしれません。
リスクを先延ばしにするのは避けたほうがいいのでは。

(無題)

削除/引用

No.1212-4 - 2011/11/18 (金) 02:50:33 - もうせ

どちらの方法も使うことがありますが、TrizolやRNAlaterで保存するのと-80で保存しておくのはどちらがいいのでしょうか？
TSさんのおっしゃるように移動の際に解けそうなので、個人的には前者がよい気がするのですが。。

(無題)

削除/引用

No.1212-3 - 2011/11/16 (水) 13:21:15 - mag

なるほど。ちゃんと温めずにやれば可能なのですね。
ありがとうございました。

(無題)

削除/引用

No.1212-2 - 2011/11/15 (火) 21:46:15 - TS

できます。

液体窒素からフリーザーへ移す間とか、一瞬でサンプルが融解しそうなので個人的にはあまりやりたくありませんが。でも、やり方次第ですね、たぶん。