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(無題) 削除/引用 No.1209-4 - 2011/11/15 (火) 10:46:41 - ~ 目的が分かりませんが、コントロールと処理群で陽性細胞の比率が異なることを示す実験であれば、別に全ての細胞が陽性になっている必要は無いと思いますが。 発色し、反応液をPBSに置換した後で冷蔵庫で1晩寝かせたら、より鮮やかな写真が撮れました。 （もちろん、コントロールも同じ時間寝かせています） また、感覚的には、分裂が停止した後しばらく経ってからでないと染まりにくいと思っています。

(無題) 削除/引用 No.1209-3 - 2011/11/15 (火) 09:54:08 - あべちゃん ７年前まで細胞老化の研究をしていました。 ３７度の反応時間はどのくらいに設定していますか？ 私は４時間でした。O/Nでほっておくとよく染色されますが、バックグラウンドもあがったと記憶してます。 老化細胞が示す表現型というのはいくつもあると思いますが、形態とSAbGal陽性とが必ず一致するといった事は無いと思います。 傾向として老化表現型が示せているのであれば、良いのではないでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.1209-2 - 2011/11/15 (火) 08:10:45 - Harmonia 無責任な発現をします。やったこと無い実験なので。 そもそもそういうものということはないのでしょうか？ 形態で分からないから染めるのではないの？ それと、均一でないという意味は、同じ細胞株を10個のシャーレに分けて培養しても、シャーレごとに染まる割合が変わるということでしょうか？ 変わらないなら、「ムラがある」ということが間違いで、「そういうもの」が正解という可能性が高いです。 変わるなら、技術的改善が必要でしょう。

SA-beta-Gal染色の染色効率について 削除/引用 No.1209-1 - 2011/11/15 (火) 07:29:52 - TakayamaG SA-beta-Gal染色の件で教えて頂きたい事があります。 現在、老化細胞数の評価をSA-beta-Gal染色で行いたいと考えています。 予備実験として、Capisiの方法とabcam：senescence detection kit (ab65351)にて評価を行いました。いづれの方法でも、老化細胞の染色を確認する事はできるのですが、染色効率が均一でありません。形態的には、老化細胞と思われる細胞でも、染まるものもあれば、染まらないものもあり、 この系をもちいて老化細胞数の評価を行うべきか、頭を抱えています。 この様なご経験のある方で、染色効率を上げる方法等ご存知でしたら、御教示頂けると幸いです。 宜しくお願い致します。

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