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生細胞の蛍光標識 トピック削除
No.1184-TOPIC - 2011/11/08 (火) 04:04:28 - HH
移植実験にて現在、移植する細胞を標識しています。骨髄単核細胞に分離後、蛍光分子にて細胞膜をシグマの特許技術リンカー法で標識させています。ここで質問です。

標識後、蛍光分子との反応を停止させるため、1%血清加完全培地にて処理後、遠心にかけると細胞は遠沈管の下に貯まらず、遠沈管の横の方に全体的にへばりついてしまいます。この現象に疑問を持っています。考えられることといえばどのようなことでしょうか?どのように防止すればよいでしょうか?よろしくお願いします。
 
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No.1184-5 - 2011/11/11 (金) 23:52:09 - hhh
完全培地が悪いって可能性はないですか?バッファーの方がいいとか?キレート剤があった方がいいとか??

(無題) 削除/引用
No.1184-4 - 2011/11/10 (木) 11:18:25 - HH
遠心機はスイング型を使用しています。

シリコナイズというと、やはり内面の組成に問題があるということでしょうか。試してみます。ありがとうございます。

(無題) 削除/引用
No.1184-3 - 2011/11/08 (火) 12:17:47 - TS
遠心機はアングルですか?
もしそうなら、スイングタイプを使えば、底に落ちてくれると思います。

(無題) 削除/引用
No.1184-2 - 2011/11/08 (火) 09:36:17 - ~
シリコナイズされた遠心チューブを使用することで、チューブ表面への結合が緩和するかもしれません。
(単なる思いつきなので、大事なサンプルでは試さないでください)

生細胞の蛍光標識 削除/引用
No.1184-1 - 2011/11/08 (火) 04:04:28 - HH
移植実験にて現在、移植する細胞を標識しています。骨髄単核細胞に分離後、蛍光分子にて細胞膜をシグマの特許技術リンカー法で標識させています。ここで質問です。

標識後、蛍光分子との反応を停止させるため、1%血清加完全培地にて処理後、遠心にかけると細胞は遠沈管の下に貯まらず、遠沈管の横の方に全体的にへばりついてしまいます。この現象に疑問を持っています。考えられることといえばどのようなことでしょうか?どのように防止すればよいでしょうか?よろしくお願いします。

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