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(無題) 削除/引用 No.1169-4 - 2011/11/04 (金) 17:02:32 - nana お二方ともありがとうございます。 三日間培地交換を行わず実験を進めたいと思います。 この議題の趣旨と異なるのですが、同様の実験を行っている方にお伺いしたいことがあります。 ＯＶＡ免疫マウス由来脾臓細胞培養におけるの培地がＯＶＡ含or不含で、細胞生存率が24時間後ほとんど変わらない（70%程度）のです。脾臓細胞への刺激ありなしでは、生存率は数日ではさほど変わらないのでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.1169-3 - 2011/11/04 (金) 10:30:38 - 3T3 同じような実験をしていますが、培地交換はしていません。 細胞を育てるような実験をする場合でも、通常培地交換は72〜96時間に１回ですし、そもそも毎日交換した場合ですと、上清中のIFN-γはどのタイミングで計るのでしょうか（３日分をmixする？）。 それよりも、細胞数をそろえるとか、脾細胞を単離する処置をそろえる方が大変なような気がしますが。

(無題) 削除/引用 No.1169-2 - 2011/11/03 (木) 12:44:36 - HIH 培地交換を行う必要はないと思います。 ただ、その実験系では何を反映する結果になるのか分かりにくいと思うので、脾臓細胞からCD4もしくはCD8陽性の細胞を精製した上でOVA刺激を行えばよいと思います。(免疫後であればOVA単独で刺激が入ります)

培養脾臓細胞の上澄みのＩＦＮ-γ測定における培地について 削除/引用 No.1169-1 - 2011/11/02 (水) 15:40:39 - nana マウスから採取した脾臓細胞を培養して、48〜72時間後に上澄み中のIFN-γを測定したいと思っているのですが、その際、一日毎に培地交換を行うべきなのでしょうか、それとも行わなくても可能なのでしょうか？ マウスはOVAで免疫したものを用いており、培地は、RPMI1640、抗生物質、目ルカプトエタノール、10% FCS、 2 mg/ml OVA、で構成しています。 初歩的な質問ですが、周りに頼れる人もおらず困っています。 よろしくお願いします。

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