Bio Technical フォーラム

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変性PAGEでサンプルが流れない トピック削除
No.1164-TOPIC - 2011/11/01 (火) 19:11:28 - 学生

 初めまして
 実験の相談をさせていただきたくて投稿しました。

 変性(尿素入り)PAGEのゲルを自分で作って流しているのですが、
 実際実験してみると、3枚中1枚のゲルで
 コームにサンプルがたまったままでした。

 なぜたまっているのが分かったかというと、
 サンプルには蛍光がついていて光をあてるとバンドが見えるのです。
 他の2枚は別々に調整したものですがきちんと流れていました。

 また失敗したゲルは、色素のみが流れていて
 目的のDNAはスタートラインで光っていました。

 DNAも別々の種類で、ゲルも別々の調整だったので、
 失敗のポイントが自分ではつかめません。
 一番の可能性はなんでしょうか。
 宜しくお願いします。
 
 
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(無題) 削除/引用
No.1164-2 - 2011/11/01 (火) 20:32:38 - たとえば
一番の原因は、ゲル調製が間違っていたということでしょう。電流を確認しているなら。

変性PAGEでサンプルが流れない 削除/引用
No.1164-1 - 2011/11/01 (火) 19:11:28 - 学生

 初めまして
 実験の相談をさせていただきたくて投稿しました。

 変性(尿素入り)PAGEのゲルを自分で作って流しているのですが、
 実際実験してみると、3枚中1枚のゲルで
 コームにサンプルがたまったままでした。

 なぜたまっているのが分かったかというと、
 サンプルには蛍光がついていて光をあてるとバンドが見えるのです。
 他の2枚は別々に調整したものですがきちんと流れていました。

 また失敗したゲルは、色素のみが流れていて
 目的のDNAはスタートラインで光っていました。

 DNAも別々の種類で、ゲルも別々の調整だったので、
 失敗のポイントが自分ではつかめません。
 一番の可能性はなんでしょうか。
 宜しくお願いします。
 

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