Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

最新のフォーラム | このフォーラム | ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

マウス肝からクッパー細胞を採取する方法 トピック削除
No.1159-TOPIC - 2011/11/01 (火) 12:44:38 - クパ
現在マウスからクッパー細胞を分離培養しようとしています.
0.5mM EGTA入りのwashing solutionでperfusionの後,
0.05%コラゲナーゼ/0.005%トリプシンインヒビター溶液でperfusion
をおこなっています.
肝細胞のviabilityは少しずつあがってきました.
肝細胞を低速遠心で沈殿させたあとの上清からクッパー細胞を分離
したいのですが,なかなかうまくいきません.
大分昔に,肝細胞研究会で配られた資料を基に,ナイコデンツを使用
してみたのですが細胞層がまったく得られませんでした.

ナイコデンツ溶液の組成は
4.02g/14ml GBSS/A それに細胞を懸濁したGBSS/Bを10ml加えるので
16.75%溶液となります.

GBSS/A :KCL MgCl2 MgSO4 Ns2HPO4 KH2PO4 Glu NaHCO3 CaCL2
GBSS/B :GBSS/A +NaCl

GBSSはなかったので,似たような組成のmediumを使用しました.
ナイコデンツの至適濃度,溶解するのに適した溶液がありましたら
教えていただければ幸いです.
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



3件 ( 1 〜 3 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.1159-3 - 2011/11/08 (火) 12:48:47 - クパ
脂肪さん

ありがとうございます.
非常におもしろい方法ですね.
試してみます.

(無題) 削除/引用
No.1159-2 - 2011/11/07 (月) 14:58:50 - 脂肪
こんなのありました。
http://www.jove.com/video/2757/a-simple-and-efficient-method-to-isolate-macrophages-from-mixed-primary-cultures-of-adult-liver-cells

マウス肝からクッパー細胞を採取する方法 削除/引用
No.1159-1 - 2011/11/01 (火) 12:44:38 - クパ
現在マウスからクッパー細胞を分離培養しようとしています.
0.5mM EGTA入りのwashing solutionでperfusionの後,
0.05%コラゲナーゼ/0.005%トリプシンインヒビター溶液でperfusion
をおこなっています.
肝細胞のviabilityは少しずつあがってきました.
肝細胞を低速遠心で沈殿させたあとの上清からクッパー細胞を分離
したいのですが,なかなかうまくいきません.
大分昔に,肝細胞研究会で配られた資料を基に,ナイコデンツを使用
してみたのですが細胞層がまったく得られませんでした.

ナイコデンツ溶液の組成は
4.02g/14ml GBSS/A それに細胞を懸濁したGBSS/Bを10ml加えるので
16.75%溶液となります.

GBSS/A :KCL MgCl2 MgSO4 Ns2HPO4 KH2PO4 Glu NaHCO3 CaCL2
GBSS/B :GBSS/A +NaCl

GBSSはなかったので,似たような組成のmediumを使用しました.
ナイコデンツの至適濃度,溶解するのに適した溶液がありましたら
教えていただければ幸いです.

3件 ( 1 〜 3 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。