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(無題) 削除/引用 No.1059-2 - 2011/10/13 (木) 23:45:27 - qq >アクリジンオレンジがIRESで目的遺伝子の後ろに繋がった状態になっています。 ??それはすごいことですね。でも何かの間違いではないですか。 GFPは、レトロが感染した細胞を特定するために入れてあるので、GFPを嫌がってはいけません。ターゲット分子を検出するときに、GFPと被らない波長の蛍光で検出するのです。

組織染色でのIRES-GFP、アクリジンオレンジの消光について 削除/引用 No.1059-1 - 2011/10/12 (水) 21:26:00 - 初心者 cell lineにレトロウィルスで遺伝子導入してその遺伝子産物の細胞内局在を共焦点顕微鏡などで観察したいと思っています。しかし、レトロウィルスベクターにはGFPやアクリジンオレンジがIRESで目的遺伝子の後ろに繋がった状態になっています。融合タンパクではなくIRESで繋がっているだけなのでGFPやアクリジンオレンジの局在は目的タンパクの局在を反映はしないため、GFPやアクリジンオレンジを何とかして消光したいと考えています。GFPはpHの変化により光が弱くなると聞いたのですが、具体的な方法について何かご存知の方にお教え頂ければ大変助かります。また、アクリジンオレンジについても消光させる方法を探しております。ご存知の方がおられましたらどうぞよろしくお願い致します。

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