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マウス性周期のチェックについて トピック削除
No.1058-TOPIC - 2011/10/12 (水) 20:56:24 - a
マウスの性周期を確認したいです。

スメアをとり、ギムザ染色をして観察しています。
ですが参考となる資料がラットのものしかありません。
マウスの場合は更に複雑でわかりにくいと聞きました。
何か参考になる写真などが載っている資料などありましたら、教えていただけませんか。

特に、発情期と発情間期で、白血球の数が違うのはわかるのですが、細胞の状態の違いがよくわからず、発情間期の始まりなのか、終わりなのか、判断がつきません。
どなたか慣れていらっしゃる方がいれば、アドバイスをお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.1058-5 - 2011/10/17 (月) 18:01:35 - Boston-Pullman
>あるサイクルが長かったり(4日間)する場合です。
あるステージが毎回長かったりの間違えです。

(無題) 削除/引用
No.1058-4 - 2011/10/17 (月) 17:58:36 - Boston-Pullman
> やはり朝チェックすることが大切なのでしょうか?
可能であれば朝6−7時、遅くとも8時くらいにしています。

> サイクルが回っていないマウスとはどういった状態なのでしょうか?
ちょっと表現が悪かったです。各ステージの長さがサイクルごとに違ったり、あるサイクルが長かったり(4日間)する場合です。

> そんなに奥まで入れなくても、簡単に偽妊娠になりますか?
経験がないので分かりません。極力入り口でスメアをとるように心がけています。チップ5mm程度入れています。PBS50uL使って、こぼれないようにマウスの頭を下に向けて、ピペッティングを4、5回しています。不十分だと、細胞のかすが翌日のスメアに影響してくるのでしっかりとやる必要があります。

> また、一度偽妊娠になってしまったマウスを判断することはできますか?
聞いた話では Diestrus の期間がながくなるそうです。そのようなマウスはサイクルが回っていないマウスとして排除するので偽妊娠マウスを見つける努力は特別必要ないです。

(無題) 削除/引用
No.1058-3 - 2011/10/15 (土) 19:40:23 - a
Boston-Pullman さん

ご丁寧なアドバイスありがとうございます。
現在私は、1日2回スメアをとっています。
マウスを扱うと、その日はできない実験があるため、1回目は同じ時間ではなく、お昼頃になってしまうこともありますが、2回目は19時きっかりにスメアをとっています。
やはり朝チェックすることが大切なのでしょうか?

また、ちゃんとサイクルが回っているマウスが少ないことに驚きました。
サイクルが回っていないマウスとはどういった状態なのでしょうか?

質問ばかりで申し訳ないのですが、スメアを取る時に奥まで入れると偽妊娠状態になると聞きました。
そんなに奥まで入れなくても、簡単に偽妊娠になりますか?
また、一度偽妊娠になってしまったマウスを判断することはできますか?
それから、偽妊娠状態はどれくらい経つと解除されるのでしょうか。

いろいろと聞いてしまってすみません。
手探り状態なので、アドバイスいただけますと助かります。

写真はないのですが 削除/引用
No.1058-2 - 2011/10/15 (土) 10:05:04 - Boston-Pullman
Estrus:ほぼ100%がシワクチャな上皮細胞。
Metestrus:シワクチャな上皮細胞に白血球が混じっている。
Diestrus:ほぼ100%が白血球。溶液が白濁しているのですぐ分かります。
Proestrus:ほぼ100%が楕円状の上皮細胞(白血球と比べて10倍ほど大きい)。細胞数はかなり少ない。白血球は認められない。

毎朝同じ時間にチェックして、2週間ほど様子をみます。わたしは染色もせず、ウェットな状態でいつも観察しています。経験上、2ヶ月齢のマウス20匹のうち、ちゃんとサイクルが回っているのは14匹程度。

マウス性周期のチェックについて 削除/引用
No.1058-1 - 2011/10/12 (水) 20:56:24 - a
マウスの性周期を確認したいです。

スメアをとり、ギムザ染色をして観察しています。
ですが参考となる資料がラットのものしかありません。
マウスの場合は更に複雑でわかりにくいと聞きました。
何か参考になる写真などが載っている資料などありましたら、教えていただけませんか。

特に、発情期と発情間期で、白血球の数が違うのはわかるのですが、細胞の状態の違いがよくわからず、発情間期の始まりなのか、終わりなのか、判断がつきません。
どなたか慣れていらっしゃる方がいれば、アドバイスをお願いします。

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