Bio Technical フォーラム

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scFVのプライマー トピック削除
No.1054-TOPIC - 2011/10/12 (水) 10:24:08 - ナナシ
scFvのプライマー作製で困っています。

マウス抗OVA抗体のscFvを作ろうとしています。scFvの作製方法は分かるんですが、クローニングするためのプライマー設計が配列情報が探しきれていないためか、いまいち分かりません。ちなみにcDNAはOVA免疫マウスの脾臓細胞から取ってこようとしてます。

どなたかご存知のかたは教えて頂けると幸いです。
　
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method本 削除/引用
No.1054-4 - 2011/10/12 (水) 16:30:19 - Ab
Antibody Engineering (Springer Protocols) 1&2
Antibody Engineering: Methods and Protocols (Methods in Molecular Biology) Humana Press
Phage Display (Manual) Cold Spring Harbor Laboratory Press
あたりかな。

(無題) 削除/引用
No.1054-3 - 2011/10/12 (水) 13:23:30 - ナナシ
Abさん、ありがとうございます。

ちょっと見てみたのですが、まだまだ分からない所があるので参考になる本などあったら教えて頂けると幸いです。

(無題) 削除/引用
No.1054-2 - 2011/10/12 (水) 12:07:53 - Ab
http://scholar.google.co.jp/scholar?q=mouse+scFv&hl=ja&btnG=検索&lr=
でいろいろ出てきますよ。新しい論文がよいでしょう。本はいろいろありますが、高価です。
IgBLAST　（http://www.ncbi.nlm.nih.gov/igblast/）でマウスIgのゲノム配列(VH,VL,VK,JH,JK,JL)をダウンロードできますので、自分で設計することをお薦めします。ベクターに組み込む際の制限酵素部位の選択・配置なども考慮できます。ただしアミノ酸配列(読み枠）を間違えないようによく考えてください。

scFVのプライマー 削除/引用
No.1054-1 - 2011/10/12 (水) 10:24:08 - ナナシ
scFvのプライマー作製で困っています。

マウス抗OVA抗体のscFvを作ろうとしています。scFvの作製方法は分かるんですが、クローニングするためのプライマー設計が配列情報が探しきれていないためか、いまいち分かりません。ちなみにcDNAはOVA免疫マウスの脾臓細胞から取ってこようとしてます。

どなたかご存知のかたは教えて頂けると幸いです。
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