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マウス胸部大動脈摘出について トピック削除
No.100-TOPIC - 2011/03/03 (木) 12:03:24 - ship

誠お忙しいところ申し訳ありませんが御教授の程宜しくお願いします。

マウス大動脈を摘出し酵素処理して内皮細胞を取り出したいと考えております。

胸部大動脈の摘出後,24Gゲージのカニューレを挿入し反対側は糸で縛り,酵素で満たしているのですが…。必ず漏れがあります。初めは手技的な問題と思っておりましたが,摘出時に肋間動脈を損傷させているからではないかと思います。

先生方はどのようにマウス大動脈を摘出しているのでしょうか?
 
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マウス胸部大動脈摘出について 削除/引用
No.100-3 - 2011/03/03 (木) 15:41:13 - ship

ami先生ご返事本当にありがとうございます。

>カニューレ側も糸で結紮しているのでしょうか?
  結紮してます。

>コラゲナーゼを注入しております。
今はトリプシンで試してましたが,コラゲナーゼも入手しており漏れが改善されたらコラゲナーゼを使用しようと考えております。

>大動脈を分離する際にはどのように行っておられますか?
今までは左心室からPBS/Heparinを還流させた後、心臓、肺など胸郭内臓器を摘出してそれからピンセットを大動脈と脊柱との間に差し込みずるずると下方へスライドさせ、動脈を摘出しておりました。
今後は先生がおっしゃるように胃や肺といった内臓を摘出し、その後、心臓をピンセットをつまみ上げながら動脈を摘出してみます。


>余計なコンタミ(ex. fibroなど)を除くための結合組織の除去や脂肪組織の除去の工程で動脈を破損させ、穴をあけてしまったことはあります。
漏れが改善されないため,ここ二,三日は穴をあけないように結合組織や脂肪組織はあまり除去しないでやっていました。それでも漏れが解消していません。


先生は心臓から腹部まで大動脈摘出されていらっしゃるようですが,腕頭動脈や腹腔動脈などを糸で結紮などはしていますか?胸部大動脈から肋間動脈も分岐しているようですが,肋間動脈は糸で結紮などは必要でしょうか?

誠お忙しいところ何度も申し訳ありませんが御教授の程宜しくお願いします。

(無題) 削除/引用
No.100-2 - 2011/03/03 (木) 12:14:00 - ami(偽物)
>胸部大動脈の摘出後,24Gゲージのカニューレを挿入し反対側は糸で縛り,酵素で満たしているのですが…。必ず漏れがあります。初めは手技的な問題と思っておりましたが,摘出時に肋間動脈を損傷させているからではないかと思います。

>先生方はどのようにマウス大動脈を摘出しているのでしょうか?

カニューレ側も糸で結紮しているのでしょうか?
私も同様の方法でコラゲナーゼを注入しております。

大動脈を分離する際にはどのように行っておられますか?
そこをきちんと書いた方がbetterかなと思います。

私は、左心室からPBS/Heparinを還流させた後、胃や肺といった内臓を摘出し、その後、心臓をピンセットをつまみ上げながら、が鎌のような形容をしたピンセットを大動脈と脊柱との間に差し込み、ずるずると下方へスライドさせ、大体8wksマウスから3 cm弱の動脈を摘出しております。
胸部大動脈だけでなく、腹部大動脈も含まれていますが。

この時点での動脈の破損はないように思います。
それよりも摘出し終えた後で、余計なコンタミ(ex. fibroなど)を除くための結合組織の除去や脂肪組織の除去の工程で動脈を破損させ、穴をあけてしまったことはあります。

参考になれば幸いです。

マウス胸部大動脈摘出について 削除/引用
No.100-1 - 2011/03/03 (木) 12:03:24 - ship

誠お忙しいところ申し訳ありませんが御教授の程宜しくお願いします。

マウス大動脈を摘出し酵素処理して内皮細胞を取り出したいと考えております。

胸部大動脈の摘出後,24Gゲージのカニューレを挿入し反対側は糸で縛り,酵素で満たしているのですが…。必ず漏れがあります。初めは手技的な問題と思っておりましたが,摘出時に肋間動脈を損傷させているからではないかと思います。

先生方はどのようにマウス大動脈を摘出しているのでしょうか?

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