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(無題) 削除/引用 No.92-4 - 2007/08/25 (土) 12:19:32 - かつら やはり粉の状態であればHis、Leuは数年は持つものなのですね。 一応、HisかLeuに何らかの要因があったのかもしれないので、もらうなり買い直すなりしてもう一度やり直してみます。 解決マーク付けておきます。ありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.92-2 - 2007/08/22 (水) 11:47:45 - 弘法 以前と、株も、プラスミドも、培地組成も、全て一緒なのだとしたら、HisまたはLeuがダメになっているか、株がストック中におかしくなったかのいずれかということになりますよね。 私たちもHisとLeuの粉末は室温でもう何年も使っていますが、特に問題ありません。ご近所のラボに少し粉末を分けて貰って調べてみてはいかがですか。 差しつかえなければ酵母の遺伝子型を教えて貰えませんか。

酵母の培地 削除/引用 No.92-1 - 2007/08/22 (水) 10:56:44 - かつら いつも参考にさせて頂いています。 酵母を使って実験をしています。Ura, His, Leu要求性の株です。 Ura3を持つプラスミドを形質転換して、Yeast nitrogen base(w/o a.a.)+Glucose+His+Leuの培地に蒔いたのですが、一週間待ってもさっぱり何も生えません。HisもLeuもGlucoseも別に作製して添加していますが、2回すべて作り直してやってみてもダメでした。以前はこれで問題なく生えていたのですが。 らちがあかないので、クロンテックの-Ura DO Supplementが手元にあったので、SD+Glucose+-Ura DO Supplement培地を作製して形質転換したところ普通に増えてきました。 こういった場合、どんな原因が考えられるのでしょうか。 培地に使用したHis,Leuは、粉とはいえ室温で多分3〜5年程度置きっぱなしのものです。粉が古くなると増えなくなるものなのでしょうか？ 取りあえずコロニーは得られたのでこの後液体培養するのですが、以前はSD+Glucose+His+Leuで培養しましたが、今回これで培養して酵母が増えるのかどうか疑問を持っています。SD+Glucose+-Ura DO Supplementで培養しても良いのですが、ものすごく負けた気分です。 酵母を扱っているのが周囲におらず、私も普段は大腸菌ばかり使っているので、何かお気づきの点があればご指摘頂けないでしょうか。 よろしくお願いします。

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