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大腸菌からの低分子抽出法 トピック削除
No.316-TOPIC - 2007/10/10 (水) 16:09:36 - kim
はじめまして。
学生です。

今取り組んでいる実験で、酵素活性に影響を与える物質を探し出すというものなのですが、、、

おそらくその物質は細胞質内の低分子であると考えられます。
ある条件化での培養で誘導される物質と考えられます。

そこで、大腸菌をその条件化で培養し、未知物質を含むと考えられる抽出液を得て、酵素と反応させて活性が出るかを見たいのです。

大腸菌培養後、遠心分離で菌体を回収し、bufferか水か何かに溶かし込んで破砕したいのですが、最適なbufferは何かアドバイスしていただければ幸いです。


たんぱく質やプラスミドを抽出する方法はたくさん検索できたのですが、
未知物質を抽出するのには何が最適でしょうか。

アドバイスよろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.316-2 - 2007/10/10 (水) 17:40:41 - !
未知なんですから誰も知らないですよ。

恐らくは、未知ゆえになるべく全ての物質の構造なり活性なりを失わずに回収したいという意味だと思いますが、それでももう少し的を絞った質問ができるかと思います。仮に誰かが、このバッファーはどうでしょう、と提案してくれたとしても、いずれは自分の実験に合ったものへ調整していかなければなりません。バッファーの候補すら挙げられないほどの初心者でないのなら、図書館でもう少し成書を調べてみるのが良いと思います。まずは自分でアイデアを出すことが大切です。そして実行、という行動力も必要ですが、それでも本当に不安な事は沢山あります。そんなときにこのような掲示板で意見を求めてみたらいかがでしょうか。

学生さんということで、お小言になってしまいましたが、頑張って下さい。

大腸菌からの低分子抽出法 削除/引用
No.316-1 - 2007/10/10 (水) 16:09:36 - kim
はじめまして。
学生です。

今取り組んでいる実験で、酵素活性に影響を与える物質を探し出すというものなのですが、、、

おそらくその物質は細胞質内の低分子であると考えられます。
ある条件化での培養で誘導される物質と考えられます。

そこで、大腸菌をその条件化で培養し、未知物質を含むと考えられる抽出液を得て、酵素と反応させて活性が出るかを見たいのです。

大腸菌培養後、遠心分離で菌体を回収し、bufferか水か何かに溶かし込んで破砕したいのですが、最適なbufferは何かアドバイスしていただければ幸いです。


たんぱく質やプラスミドを抽出する方法はたくさん検索できたのですが、
未知物質を抽出するのには何が最適でしょうか。

アドバイスよろしくお願いします。

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