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抗体の固定化 トピック削除
No.2804-TOPIC - 2009/02/05 (木) 04:20:40 - 教えてください
基本的なことですみません
今行おうとしているプロトコールですが、
細胞を培養するときに抗体を固定化したプレートで培養するとあります。
このときに使うプレートは特別なものを使うのでしょうか?

ただ単に抗体の溶液をプレートにまくだけで、通常のプレートに、たくさん吸着するとは思えないのですが、

またそのときの抗体に、FACS用のFITCやPEラベルされた物とか使えるのでしょうか?
 
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(無題) 削除/引用
No.2804-6 - 2009/02/05 (木) 10:19:54 - 教えてください
免疫シナプスの模倣だったのですね。
もう一度教科書を読んで勉強しなおします。
有難うございました。

CD3刺激からの刺激もありますね

有難うございました

(無題) 削除/引用
No.2804-5 - 2009/02/05 (木) 09:15:11 - まっくろん
 抗CD3で、培養する細胞を刺激するのではないでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.2804-4 - 2009/02/05 (木) 08:02:14 - 免疫屋
> ついでといっては申し訳ないのですが、
> NKT細胞の培養なのですが、CD3抗体で固層化するようなのですが
> どうして抗体を固層化したプレートで培養するのでしょうか
> 細胞を接着させるときと、させないときでそんなに変わるものなのでしょうか?

免疫シナプスおよびその必要性を御存知ですか?
抗体の固層化でそれを模倣すると言えば理解できますでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.2804-3 - 2009/02/05 (木) 06:32:33 - 教えてください
すばやい回答誠に有難うございます。
大変助かります

ついでといっては申し訳ないのですが、
NKT細胞の培養なのですが、CD3抗体で固層化するようなのですが
どうして抗体を固層化したプレートで培養するのでしょうか
細胞を接着させるときと、させないときでそんなに変わるものなのでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.2804-2 - 2009/02/05 (木) 04:43:07 - 免疫屋
T細胞の培養と考えて回答致します.

> 細胞を培養するときに抗体を固定化したプレートで培養するとあります。
> このときに使うプレートは特別なものを使うのでしょうか?

普通の培養用プレートで充分です.

> ただ単に抗体の溶液をプレートにまくだけで、通常のプレートに、たくさん吸着するとは思えないのですが、

ただ単に抗体溶液をプレートにまくだけで吸着します.固層化にはPBS(無血清,無タンパク)を利用し,4℃O/N,あるいは室温や37℃で数時間で固層化可能です.


> またそのときの抗体に、FACS用のFITCやPEラベルされた物とか使えるのでしょうか?

使ってはいけない理由はあまりなさそうですが(使ったことはないので標識による弊害の詳細などは知りませんが),個人的にはNaN3が入っていますので培養にはあまり使いたくありませんね(洗浄をしっかりすれば良いのかもしれませんが).

抗体の固定化 削除/引用
No.2804-1 - 2009/02/05 (木) 04:20:40 - 教えてください
基本的なことですみません
今行おうとしているプロトコールですが、
細胞を培養するときに抗体を固定化したプレートで培養するとあります。
このときに使うプレートは特別なものを使うのでしょうか?

ただ単に抗体の溶液をプレートにまくだけで、通常のプレートに、たくさん吸着するとは思えないのですが、

またそのときの抗体に、FACS用のFITCやPEラベルされた物とか使えるのでしょうか?

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