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(無題) 削除/引用 No.2700-7 - 2009/01/23 (金) 12:55:04 - 初心者 有難うございました。 なるほど。。温水の温度を上げる、薄く切るなど全く思いつきませんでした。早速試してみます。 ご指導頂き有難うございました。

(無題) 削除/引用 No.2700-6 - 2009/01/22 (木) 19:34:18 - 組織 >切片をさらに薄くするのもお勧めです。 確かに、薄くした方がそり返りにくいかもしれませんね。脱灰不十分とのことなのでかなり切り難いかもですが。試してみる価値はありそうです。

(無題) 削除/引用 No.2700-5 - 2009/01/22 (木) 18:52:28 - A 温水の温度を50度くらいにあげてみてはいかがですか？ 切片をさらに薄くするのもお勧めです。 冷凍庫でガンガンに冷やせば、薄く切るのは簡単だと思います。

(無題) 削除/引用 No.2700-4 - 2009/01/22 (木) 15:27:31 - 組織 >切片が縮んでパラフィンともくっついていないような感じ 脱灰もでしょうが、この書き込みを見るとパラフィンの浸透が不十分な気がしますね。こういう時は、固定不足あるいは脱水不足を原因として疑います。 もし脱灰不足だけが問題なら、表面脱灰してから薄切すればある程度は切れるようになると思います。固定や包埋時の問題だと解決は難しいかもしれません。私なら駄目元で切片を厚くしてみたりしますが、、

(無題) 削除/引用 No.2700-3 - 2009/01/22 (木) 14:24:22 - 初心者 早速返信いただき有難うございます。 ＞スライド上に一度のった切片がめくれてしまうということでしょうか？ それと白くなるというのは、組織だけですか？それとも組織がのってないパラフィン部分もですか？ そうなんです。組織を薄切した後、スライドにのせて乾燥させているうちに、切片が真っ白になって、スライドから一部ひどいときには半分以上はがれてきます。パラフィンの部分は大丈夫です。切片が縮んでパラフィンともくっついていないような感じなのです。 温水につける時間を長くしてしわをしっかり伸ばしたほうが良いといわれてやってみましたが、特に違いはないように思えました。 ＞固定、脱灰、包埋までの手順を教えて下さい。あと薄切時の切片の厚さも教えて下さい。 実は私がつくったブロックではありませんので、残念ながら詳しくはわかりません。ただ１ついえることは脱灰が不十分のようで、なかなかうまく切れません。切片は５ミクロンです。 骨組織ははがれやすいとおっしゃっていましたが、それを防ぐ何か良い方法はあるのでしょうか？ サンプルもだいぶ減ってきましたし、うまく切れないし、染めてもはがれてしまったりで、参っています。難しいですね。

(無題) 削除/引用 No.2700-2 - 2009/01/22 (木) 13:32:50 - 組織 >切片を４２度の温水でしばらく伸ばし、スライドにのせ乾燥させ始めると、白くなってはがれ始めます これがどういう状態かわからないのですが、スライド上に一度のった切片がめくれてしまうということでしょうか？ それと白くなるというのは、組織だけですか？それとも組織がのってないパラフィン部分もですか？ 使われているのが市販のシランコートガラスなら、おそらくサンプルの問題ではないでしょうか。 骨組織は確かにはがれやすいですが、そんな状態になることはないと思います。 固定、脱灰、包埋までの手順を教えて下さい。なにか問題点が見つかるかもしれません。 あと薄切時の切片の厚さも教えて下さい。

免疫染色用切片 削除/引用 No.2700-1 - 2009/01/22 (木) 12:22:49 - 初心者 免疫染色用に、主に骨のパラフィン切片を作っています。＋チャージのスライドを使っていますが、切片を４２度の温水でしばらく伸ばし、スライドにのせ乾燥させ始めると、白くなってはがれ始めます。それでも染色を試みてみましたが、はがれたり折り重なったりで全くだめです。何が原因でしょうか？ご教示頂けると助かります。よろしくお願い致します。

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