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レンチウイルスのマウスへの感染 トピック削除
No.2683-TOPIC - 2009/01/20 (火) 11:54:09 - まうす
マウス由来の細胞株もしくはMouse Embryonic Fibroblast(MEF)にレンチウイルスを用いてshRNAを発現させる実験を計画しております。当方はまだレンチウイルスの系を立ち上げておりませんので、まずマウス細胞もしくはMEFにレンチウイルスが感染するのかどうかについての情報を集めています。幾つかの論文ではマウス細胞株にレンチウイルスを用いてshRNAを発現させた例を見るのですが、学会でレンチウイルスを用いて実験された方からマウス細胞にはレンチウイルスは感染しない(しにくい)と聞きました。また、噂で同様の話を聞きました。もし、このマウスへのレンチウイルス感染効率等についてご存知の方がいらっしゃいましたら、真偽のほどを教えて頂けませんでしょうか?よろしくお願い致します。
 
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(無題) 削除/引用
No.2683-3 - 2009/01/20 (火) 12:53:46 - りょう
感染します。
僕のショボイshRNA発現の経験ではtransientでは充分な(westernで差が認められる)ノックダウンは得られませんでしたが、薬剤耐性細胞をexpandして検討すると、70-80%くらいのノックダウンが確認できています。
transientで充分な効果を期待するには、MOIを上げるとか、ポリブレンや他の試薬を使用して感染効率を上げる必要があるのでしょう。
細胞種によって向き不向きはあると思いますが、株化細胞・初代培養共に感染可能です。

http:// 削除/引用
No.2683-2 - 2009/01/20 (火) 12:00:33 - TK-1
VSVgでpseudotypingすれば感染します。

レンチウイルスのマウスへの感染 削除/引用
No.2683-1 - 2009/01/20 (火) 11:54:09 - まうす
マウス由来の細胞株もしくはMouse Embryonic Fibroblast(MEF)にレンチウイルスを用いてshRNAを発現させる実験を計画しております。当方はまだレンチウイルスの系を立ち上げておりませんので、まずマウス細胞もしくはMEFにレンチウイルスが感染するのかどうかについての情報を集めています。幾つかの論文ではマウス細胞株にレンチウイルスを用いてshRNAを発現させた例を見るのですが、学会でレンチウイルスを用いて実験された方からマウス細胞にはレンチウイルスは感染しない(しにくい)と聞きました。また、噂で同様の話を聞きました。もし、このマウスへのレンチウイルス感染効率等についてご存知の方がいらっしゃいましたら、真偽のほどを教えて頂けませんでしょうか?よろしくお願い致します。

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