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growth curveの条件 トピック削除
No.2672-TOPIC - 2009/01/18 (日) 20:24:36 - メイショウタカシ
今自分が解析している遺伝子の安定発現細胞株を作製して、growth curveをかいているのですが、毎日MTT assayしているとぶれてしまいます。2日毎とか3日毎のtime pointのほうがいいのでしょうか? またmedium交換は、何日ごとに行えば、ぶれないdetaが作れるのでしょうか?
ご存知の方がいらっしゃれば教えてください。
 
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No.2672-5 - 2009/01/26 (月) 10:40:57 - ~
毎日ぶれるというのはどのようなぶれ方ですか?
ウェルごとにぶれるのであれば、撒き数や測定時に問題があることが予想されます。
日ごとにぶれるのであれば、処理時間のブレや、コントロールに問題があることが予想されます。

Medium交換の目的は何ですか?
継代しない増殖曲線であれば、培地交換はしない場合もあります。

(無題) 削除/引用
No.2672-4 - 2009/01/26 (月) 09:45:00 - TO
私も毎日測定するのが良いと思います。
何週間の培養でのgrowth curveかわかりませんが、一週間以上するのであれば、MCは考えないといけないですね。
細胞老化の実験で行う予定であれば、継代ごと(横軸が継代数)の測定をすると思います。
面倒かもしれませんが、コールターカウンターや血球算定板での実数の測定をしておくと、ODメーターの調子の良し悪しがわかると思います。

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No.2672-3 - 2009/01/26 (月) 08:14:32 - フサイチケンジ
おそらくODメーターに問題あると思います。
別の測定機器がありましたら、測定しなおしたらいかがでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.2672-2 - 2009/01/19 (月) 10:28:43 - _
ん〜。

普通は毎日ではないでしょうか?
グロースカーブを書いている時にmcは行いませんが、一週間以上も培養されれるのですか?

ぶれるとは、どの程度なのでしょうか?
細胞数で四倍五倍も異なるのでしょうか?

growth curveの条件 削除/引用
No.2672-1 - 2009/01/18 (日) 20:24:36 - メイショウタカシ
今自分が解析している遺伝子の安定発現細胞株を作製して、growth curveをかいているのですが、毎日MTT assayしているとぶれてしまいます。2日毎とか3日毎のtime pointのほうがいいのでしょうか? またmedium交換は、何日ごとに行えば、ぶれないdetaが作れるのでしょうか?
ご存知の方がいらっしゃれば教えてください。

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