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(無題) 削除/引用 No.267-3 - 2007/10/03 (水) 17:09:52 - V4 転写効率は蛋白の性質にもよると思います。 高分子量の蛋白は、一般的に転写効率が悪いです。 高電流・短時間で転写効率の悪い蛋白(高分子蛋白など）には １）バッファーの組成を変える もしくは ２）低温度で長時間(O/N)かけて転写させるなどの改善策をとります。 semi-dryの場合、１）の改善策をとります。 不連続バッファーなど使います。 2）は不可。 バッファーの量が少ないため、長時間の転写をおこなうとバッファー中のイオンが不足したり、転写バッファーがなくなるなどの問題が生じるため。 その一方で、tank式は 1）も2）にも対応可能です。 どんな蛋白にも転写条件を柔軟に変えることが可能なので、 タンク式の方が転写効率が良いといわれるのだと思います。

(無題) 削除/引用 No.267-2 - 2007/10/03 (水) 03:21:48 - 熱血漢 ＞これはどうしてでしょうか？ 自信ありませんが、セミドライだとすぐにイオンのバランスが限界に達してしまうような？ ＞十分温度を冷やして転写させればサブマリン型と同程度に高分子量タンパクも転写されますか？ 個人的には温度よりも時間をかけるのがいいと思います。オーバーナイトなど。

サブマリンとセミドライ型トランスファー 削除/引用 No.267-1 - 2007/10/02 (火) 15:25:57 - うえすたん サブマリン型の方が、セミドライより転写効率がよく、高分子量タンパクもよく転写される、と言われていますが、これはどうしてでしょうか？ セミドライは熱くなって乾いてしまうので高電流を流せないから、ということでしょうか？ 十分温度を冷やして転写させればサブマリン型と同程度に高分子量タンパクも転写されますか？

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