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ありがとうございます 削除/引用 No.2665-7 - 2009/01/19 (月) 17:30:35 - sara 皆様、低レベルな質問にお答えいただき感謝しております。 勉強させていただきます。

(無題) 削除/引用 No.2665-6 - 2009/01/17 (土) 16:58:01 - おお http://en.wikipedia.org/wiki/Nuclear_receptor

(無題) 削除/引用 No.2665-5 - 2009/01/17 (土) 16:18:16 - taka かなり大雑把な説明ですが。 NF-kBのタンパクは発現していますが、通常は細胞質にトラップされています。 シグナルが入るとトラップが外れて核移行し、転写を活性化します。 なので、発現量＝活性の高さではない。ということです。

転写因子の活性を見るには。 削除/引用 No.2665-4 - 2009/01/17 (土) 14:46:51 - sara ご回答下さったおお様、natu様有り難うございます。 見たい調節因子はb-ZIPのAP-1です。 発現しているからといって、活性していなければ、下流の遺伝子を制御していると言えないということですね。 ただ、以下の文章の意味する事が理解出来ていません。 もし、可能であればご教示下さい。 NFkBとか核内りせぷたー のようなれいもありますので、 発現=活性ではないことはお分かりいただけると思います。

(無題) 削除/引用 No.2665-3 - 2009/01/17 (土) 01:05:57 - natu 転写因子と一口に言ってもいろいろとあるのですが、 bZIPのようないわゆる｢転写調節因子｣でいいのですか？ 転写調節因子の機能は主に ・核移行　・DNA結合　・転写調節 からなり、それぞれ異なる方法で個別に活性を解析する必要があります。 単体ですべてを持たないものも多いです。 このうち転写調節能についてはレポーター遺伝子を指標に 定量的に解析する方法があり、 ルシフェラーゼというのはこのことを指しているのではないかと思います。

(無題) 削除/引用 No.2665-2 - 2009/01/17 (土) 00:59:48 - おお たんぱく質は発現しているからといって、活性化されているとは 限りません。ある転写因子が、発現しているという事実が重要 な時は活性は2の次となると思いますが、転写因子が発現して それが、下流の遺伝子を制御していることに重きがあるなら 活性は実験に重要(場合によっては必須)なデーターです。そういう時は かえって発現をみないで、活性だけで実験する場合も あり得るかと思います。 NFkBとか核内りせぷたー のようなれいもありますので、 発現=活性ではないことはお分かりいただけると思います。 細胞をこわして(ライセーとをとって)発現を見るのであれば、 ELISAのほかに、ウエスタンぶロットが使えると思います。 転写因子の活性は直接てきなものやかんせつてきなものなど 多種やりかたがあると思いますが、核抽出物のげるしふと るしフェラーラーゼあっせい、CHIPあっせい、下流の遺伝子 の発現の上昇、、、などでしょうか。

転写因子の活性を見るには。 削除/引用 No.2665-1 - 2009/01/16 (金) 21:22:10 - sara 初心者で初歩的すぎると思われる質問ですが、ご享受頂ければうれしいです。 今まで実験では発現の変化を見たいとき、ELISA、FACSなどで対応出来ました。 転写因子もタンパク質ですが、論文を見るとルシフェラーゼ活性などで測定しています。 転写因子は活性を見るのが目的なのでしょうか？？？ 細胞を壊して、中のタンパクを測定する事は出来ないのでしょうか？ また転写因子の増減（活性増減？）を知りたい時に、ルシフェラーゼのような一般的に用いられる方法があれば教えて頂きたいです。

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