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RNA抽出kit トピック削除
No.186-TOPIC - 2007/09/12 (水) 15:30:33 - しゃく
みなさん、こんにちは。

研究室で使っているRNA抽出キットについて教えて下さい。

うちでは以前はQIAGEN社のものを使っていましたが、より安価なtakara社のものに変えました。しかしこのtakara社のキットは10cm dishコンフル程度のの細胞回収にはカラムを2本用いなければならず、結果的にあまり節約にはつながりません。

皆さんがお使いのものでお勧めや、情報等がございましたらお教え下さい。
 
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結局プロメガのkitがきました 削除/引用
No.186-6 - 2007/10/05 (金) 09:40:58 - しゃく
Kitさん
ISOGENはAGPC法で、原理がちがうのですね。real timeにまわすのでフィルター系の方がいいですね。

ところで
そのフィルターにサンプルを通す前の話なのですが、Q社やS社、勧められたNM社のものは一度別のカラムに通します。P社のものは遠心をします。T社は直です。
これらの前処理はどういう意味を持つのでしょうか?

ご存知の方がいらっしゃれば教えてください。

(無題) 削除/引用
No.186-5 - 2007/09/19 (水) 11:28:52 - Kit
私の勝手な考えですが。
実験によって求められる方を。

フェノール系(Trizol,Isogen)
安価だがRNAへのダメージが強く、ごみが多い。

フィルター系(各社Kit)
高価だがダメージは最小限、精製度も高い。
しかし、会社によって回収力・精製力に差がある。

(無題) 削除/引用
No.186-4 - 2007/09/18 (火) 21:57:25 - しゃく
返事が遅くなって済みません。


ともさん

>日本ジーンのISOGEN

は1E7 cellsまで大丈夫で、タンパクとDNAも同時に単離出来るのですね。
便利ですね。


TSさん
今まで粘度で特に苦労したことはありませんでしたが、少なくともQ社のものよりは良さそうですね。

お二方、レスありがとうございました。先生に伝えてみます。

MACHEREY-NAGELの 削除/引用
No.186-3 - 2007/09/12 (水) 20:46:13 - TS
NucleoSpin RNA IIまたはLは、どうでしょう?IIで5E6 cell、Lで5E7cellまでとれます。Q社のカラム式より安く、プレカラムでcell lysateの粘度が下がって扱いやすいです。値段も少しだけ安いし、DNaseも含まれています。逆にR社のキットは、Lysis bufferが泡立ちやすくLysateをカラムに回収するのに苦労しました。

(無題) 削除/引用
No.186-2 - 2007/09/12 (水) 20:14:37 - とも
日本ジーンのISOGENはいいですよ!安いし、DNAのコンタミもほぼないし。

RNA抽出kit 削除/引用
No.186-1 - 2007/09/12 (水) 15:30:33 - しゃく
みなさん、こんにちは。

研究室で使っているRNA抽出キットについて教えて下さい。

うちでは以前はQIAGEN社のものを使っていましたが、より安価なtakara社のものに変えました。しかしこのtakara社のキットは10cm dishコンフル程度のの細胞回収にはカラムを2本用いなければならず、結果的にあまり節約にはつながりません。

皆さんがお使いのものでお勧めや、情報等がございましたらお教え下さい。

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