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(無題) 削除/引用 No.162-3 - 2007/09/10 (月) 16:03:55 - JM109 >penさま お返事ありがとうございます。 なるほど、いつも前培養長かったですからね…。 今度は朝から前培養やってみてそれから植えついでみます。 結果はまたこちらに書こうと思います。 ありがとうございました。

LB培養の時間 削除/引用 No.162-2 - 2007/09/07 (金) 16:01:40 - pen LBでの培養が長く大腸菌が増えすぎてしまった場合、 それをM9培地に植え継いでも増殖しない事があります。 LBでの培養時間を短くするか低温にして、 対数増殖期を出る前に(ODだと0.8から1くらい）で植え継ぐようにすると良いかもしれません。 一晩培養した後の植え継ぎでは増えなかったものが、 37℃でLB培養6時間程度で植え継いだときに 増えるようになった事が何度があります。

M9培地での大腸菌培養 削除/引用 No.162-1 - 2007/09/07 (金) 15:40:08 - JM109 ある蛋白質の立体構造を解明するため、大腸菌BL21(DE3)株をM9培地で培養しているんですが、OD600の値が全然増えません。 方法は、プラスミドDNAをBL21(DE3)にトランスフォームし、LBプレートにまいて一晩培養します。 出てきたシングルコロニーをLB液体培地にストリークし、一晩振とう培養します。 翌朝それの1/100をM9培地に入れて本培養スタート、OD600を測って増殖曲線を描いています。 が、今のところ24時間培養してもODが0.17ぐらいにしかならずに困っています。 BL21(DE3)の代わりにBL21(DE3)LysSでもやってみましたが増えません。 ご教示頂けますと幸いです。

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