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封入体巻き戻し 尿素溶液の調整について トピック削除
No.128-TOPIC - 2007/08/30 (木) 01:09:13 - 学生
学生です。かなり初歩的なことですがよろしくお願いします。

大腸菌でタンパク質発現を行っていてその不溶性画分を透析で
巻き戻ししようと考えています。
そこでまず8M尿素溶液(pH8.0)の調製を試みたのですが室温程度では
多量の尿素が析出してしまい,溶液の温度が約30℃でないと尿素が
溶けません。このような場合,pH調製は30℃で合わせてしまっても
よいのでしょうか?

よろしくお願いします。

8M尿素溶液
Urea     8M
DTT 10mM
Tris 50mM
HCl
蒸留水
 
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(無題) 削除/引用
No.128-4 - 2007/08/31 (金) 15:39:23 - 学生
ご回答ありがとうございます。

尿素溶液ですが室温でも溶けました。
どうやら20度にしようと氷水で急冷したために
尿素が析出してしまったようです。
スターラーで攪拌してたのですが…

ありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.128-3 - 2007/08/30 (木) 13:16:26 - w
いや8Mureaは結構、析出しますよ。30度でpH測定しても全然問題ないです。ureaの分解はそう早くは起こりません。

(無題) 削除/引用
No.128-2 - 2007/08/30 (木) 10:32:25 - Winter8
尿素の溶解度はメチャメチャ高い。
8Mなら室温でも充分だと思うけど、何か間違っていませんか?

封入体巻き戻し 尿素溶液の調整について 削除/引用
No.128-1 - 2007/08/30 (木) 01:09:13 - 学生
学生です。かなり初歩的なことですがよろしくお願いします。

大腸菌でタンパク質発現を行っていてその不溶性画分を透析で
巻き戻ししようと考えています。
そこでまず8M尿素溶液(pH8.0)の調製を試みたのですが室温程度では
多量の尿素が析出してしまい,溶液の温度が約30℃でないと尿素が
溶けません。このような場合,pH調製は30℃で合わせてしまっても
よいのでしょうか?

よろしくお願いします。

8M尿素溶液
Urea     8M
DTT 10mM
Tris 50mM
HCl
蒸留水

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