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(無題) 削除/引用 No.973-4 - 2008/04/17 (木) 07:10:09 - Boston RNA 様、おお様 コメント有り難うございます。先方にサンプルの一部を RNA 解析用に保存してもらえるか聞いてみます。

(無題) 削除/引用 No.973-3 - 2008/04/16 (水) 13:53:24 - おお 血液の半分をRNA用として直ぐに精製キットなどの手順でRNAを精製するか、その途中段階で保存できるステップで凍結するかして、残りを血清に回すとかできないですか?けっぺいにまで持っていく段階で遺伝子発現とか変わったりとかすると思うのですが、それを無視できますか?

(無題) 削除/引用 No.973-2 - 2008/04/16 (水) 13:26:45 - RNA どの細胞由来のRNAを目的にされているのでしょうか? もし決まってるのであれば、その細胞を比重遠心にて分離した状態で回収、RNAをフェノール系の試薬で取ればいいと思います。このときは、血清も一応使えたと思います。 共同研究先がどうしても普通に遠心で血清を回収したいと言われるのであれば、RBCのLysis bufferなどが販売されているので、それを使用してRBCを除去した上でRNAを回収すれば、大丈夫かと思います。 ただし、この場合は、PMN, monocyteなど全部混合している状態なので、注意は必要かと思います。 lysingに関しては、市販の試薬を使用する以外の方法もありますが、この試薬を購入した方が安全かと思います。 分かりにくい文章ですが、お役にたてたら光栄です。

血餅からの RNA 単離 削除/引用 No.973-1 - 2008/04/16 (水) 12:15:06 - Boston ヒト末梢血より RNA を単離して、real-time PCR を行う予定です。しかし、共同研究先がどうしても血清を集めて解析したいとの事で、血餅より RNA を単離しなければなりません。フェノール性試薬と混ぜて、懸濁を試みたのですが、無理でした。どなたかプロトコールをお持ちでしたら、教えて頂けないでしょうか？宜しくお願いします。

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