いつも拝見させていただいています。
今回は質問があり、投稿いたしました。
現在、multisite gateway proでプラスミドの構築をしています。今回は４つのインサートを最終的にデスティネーションベクターpcDNA-DEST47に入れようと考えています。現在、エントリークローンの作成まで終了したのですが、最後の組み換え（４つのフラグメントをデスティネーションベクターに入れる）がうまく行きません。
問題のひとつとしては、最後の組み換えにミニプレップしたエントリークローンを使っているということが考えられます。
そこでお聞きしたいのですが、最後のＬＲ組み換えにはミディやマキシプレップしたサンプルでないといけないのでしょうか？また、どなたかmultisite gateway proを使用したことある方で、注意すべき点などアドバイスいただけますでしょうか？
よろしくお願いいたします。 |
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