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抗体の使用適正について トピック削除
No.865-TOPIC - 2008/03/22 (土) 11:40:03 - 初心者
現在、抗体を新たに購入したいと思っていますが、
抗体の種類が多くて、どれを買うべきか迷っています。
通常は、いままでラボで使ってきた信頼できるメーカーの抗体があればそれを選択するのですが、
今回のターゲットに対する抗体は、その会社が作ってないことに加えて、販売している会社が(自分の中で)無名かハズレ抗体が多いメーカしかありません。
皆さんは、どのように抗体を選択していますか?
また、WB, IF, IHCなど、抗体の適正使用が書かれていますが、書かれている以外の実験には使用できないのでしょうか?
例えば、FACS用抗体はWBには使えないのでしょうか?

以上の2点に関してですが、ご意見をお聞かせください。
 
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(無題) 削除/引用
No.865-4 - 2008/03/22 (土) 16:07:41 - おお
あと、ウエスタンだとその写真が載っている場合は以下のことを見てください。
レーンの上から下まですべて示しているか
リコンビナントのウエスタンだけでライセートのウエスタンが載っていない
内在性の物を見ているか、それとも過剰発現したものを検出しているか

(無題) 削除/引用
No.865-3 - 2008/03/22 (土) 15:58:15 - おお

> 例えば、FACS用抗体はWBには使えないのでしょうか?
メーカーの提示している使用適正に載っていない物の理由は2種類あります。一つは使えないから。もう一つはその方法について試したことが無いからです。注意深く読むとそのへんまで説明してあるものもありますが、たいていそこまで親切でなかったりします。メーカーで作っているものの一部は、誰か研究者が作った、発表された方法に準じて作っている場合がありますので(ただし、完全に一緒でなかったりもするわけですが)、メーカーの示しているリファレンスや、その著者がその後何か違ったアプリケーションをしているかなど見てみるのもいいかもしれません。
また、研究者で作ってパブリッシュされたものなら、幾らか譲ってもらえるかもしれませんよ。

あとは、丹念にそのタンパクを実際に見ている文献を集めて、どんな(どこの)抗体を使っているか調べてよさそうな抗体を買うのがいいかと思います。

(無題) 削除/引用
No.865-2 - 2008/03/22 (土) 12:20:35 - PD
>例えば、FACS用抗体はWBには使えないのでしょうか?

使えるものもあれば使えないものもある.


>抗体の種類が多くて、どれを買うべきか迷っています。

Paperで使用報告のあるものを優先する.

以上

抗体の使用適正について 削除/引用
No.865-1 - 2008/03/22 (土) 11:40:03 - 初心者
現在、抗体を新たに購入したいと思っていますが、
抗体の種類が多くて、どれを買うべきか迷っています。
通常は、いままでラボで使ってきた信頼できるメーカーの抗体があればそれを選択するのですが、
今回のターゲットに対する抗体は、その会社が作ってないことに加えて、販売している会社が(自分の中で)無名かハズレ抗体が多いメーカしかありません。
皆さんは、どのように抗体を選択していますか?
また、WB, IF, IHCなど、抗体の適正使用が書かれていますが、書かれている以外の実験には使用できないのでしょうか?
例えば、FACS用抗体はWBには使えないのでしょうか?

以上の2点に関してですが、ご意見をお聞かせください。

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