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初！　site-directed mutagenesis トピック削除
No.812-TOPIC - 2008/03/12 (水) 10:03:13 - help

stratageneのsite-directed mutagenesis kitを買ってはじめてmutant作りに挑戦しようとしてます。
まだまだ、研究歴は浅く、kitの説明書だけでは理解できないことが多いので多くの方々にご意見をいただきたいです。

（１）やはりprimer設計が一番肝心だと聞いてますが、primer設計はどごでやればいいのですか。また、primerのpurification (HPLCかPAGE）は必須でしょうか。

（２）作業自体は難しくはないですが、もし、trickyなところがあれば教えてください。
　
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(無題) 削除/引用
No.812-2 - 2008/03/12 (水) 16:05:42 - Pumpkin
東大の以下URLを参考にして下さい。
www.iam.u-tokyo.ac.jp/bnsikato/protocol/b10.html

上記のラボマニュアルにも書いてある通り、kit自体が高価なので僕はDpn1を買ってやったことはあります。

初！　site-directed mutagenesis 削除/引用
No.812-1 - 2008/03/12 (水) 10:03:13 - help

stratageneのsite-directed mutagenesis kitを買ってはじめてmutant作りに挑戦しようとしてます。
まだまだ、研究歴は浅く、kitの説明書だけでは理解できないことが多いので多くの方々にご意見をいただきたいです。

（１）やはりprimer設計が一番肝心だと聞いてますが、primer設計はどごでやればいいのですか。また、primerのpurification (HPLCかPAGE）は必須でしょうか。

（２）作業自体は難しくはないですが、もし、trickyなところがあれば教えてください。
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