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うっかりPCR酵素を超純水で希釈 トピック削除
No.770-TOPIC - 2008/03/03 (月) 21:07:58 - PCR
Ex Taq を超純水で希釈後、
即、マスターミックスに入れて
PCR しました。

それでも、きちんと増幅されるでしょうか?

調製しながら
バッファーで希釈するべきだったと反省しています。

泳動して確かめますが
どなたか経験された方いらっしゃいましたら
経験談を教えてください。
 
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トピ主から 解決済み 削除/引用
No.770-5 - 2008/03/04 (火) 17:42:55 - PCR
RT 様
お返事ありがとうございます。
そして、結果をお待ち?の皆様
お待たせいたしました。

今朝の泳動結果によると・・・

★PCR 増幅が確認されました。

酵素をバッファーで希釈したPCRもしましたが
同一の結果が得られております。

また、すべてRT 様のおっしゃるとおりですね。

よい経験になりました。
ありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.770-4 - 2008/03/04 (火) 17:00:04 - RT
おそらく大丈夫だったと思います。
もし走らなければかなり活性の落ちてる酵素(古い)だったと思います。

あまりお勧めは出来ませんが、水で希釈しても素早く反応系に混ぜてしまえばPCRは走ると思います。しかしクオリティーの低下は多かれ少なかれあると思いますので、Bufferで希釈するほうがいいでしょう。

(無題) 削除/引用
No.770-3 - 2008/03/04 (火) 16:21:56 - CIP
実は私も結果を待っている一人なのですが、、、、、、

(無題) 削除/引用
No.770-2 - 2008/03/04 (火) 13:50:37 - ~
そろそろ結果が出ましたか?

うっかりPCR酵素を超純水で希釈 削除/引用
No.770-1 - 2008/03/03 (月) 21:07:58 - PCR
Ex Taq を超純水で希釈後、
即、マスターミックスに入れて
PCR しました。

それでも、きちんと増幅されるでしょうか?

調製しながら
バッファーで希釈するべきだったと反省しています。

泳動して確かめますが
どなたか経験された方いらっしゃいましたら
経験談を教えてください。

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