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おかげさまで 削除/引用 No.766-7 - 2008/03/04 (火) 15:18:57 - 初心者 おかげさまで、本日ポジコンを用いて確認したところ、一応以前と変わらないバンドが確認できました。多分無事だったんだと思います。 皆様、本当にありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.766-6 - 2008/03/03 (月) 18:22:09 - MN 拝見して余談で申し訳ありませんが、 抗体が貴重とのことですので 確認にはひとまずポジコンを用いて ドットブロットで確認してみると　 少ない抗体液量で使用に支障がないかどうかは 確認できると思います。 がんばって下さい。

(無題) 削除/引用 No.766-5 - 2008/03/03 (月) 18:10:44 - 名無し あくまで一般論だけど抗体はかなりタフな蛋白質と思っていい。室温で１、２日くらいならたぶん問題ない。（ただしエーザイドみたいな防腐剤が入ってないと雑菌が増えて腐ってそれで抗体がダメになる事はあるかもしれない）昔、真夏に常温で送ってもらった事あるけど何でもなかった。ただ抗体は活性が落ち始めると一気に失活するような気がする。（先週ちょっといつもよりシグナルが弱いかな、とおもったら今週はもう全く出ないみたいな感じ）あと凍結融解の方が失活しやすいから、いまのそれがグリセロールなしで−２０C保存とかしてた抗体だったら、その抗体は再度凍らせずに防腐剤入れて４Cで保存した方がいいと思う。

安心しました 削除/引用 No.766-4 - 2008/03/03 (月) 11:44:23 - 初心者 ねずみさん、モノクロさん お返事ありがとうございます。 もちろんポジコンを用いて確認する必要がありますが、 とりあえず、まだ希望が残っていると聞いて安心しました。 貴重な抗体なので・・・ ちなみに、私が放置していたのはrabbitのpolyclonal Abです。 明日にでも確認してみたいと思います。

(無題) 削除/引用 No.766-3 - 2008/03/03 (月) 09:02:07 - モノクロ ねずみさんと同意見です。ちなみに学生時代、自作した抗血清をうっかり忘れて一晩室温で放置したケースと部屋の片隅にあったディープフリーザーの故障により、2日以上室温で放置したケースでも性能に全く問題ありませんでした。抗体がpAbの場合ならアルブミン等の混在タンパクが保護作用を発揮してくれると思います。一方、mAbでも培養上清のままならＦＣＳ由来のＢＳＡが保護してくれると思います。精製mAbの場合は若干変性が早まりそうですが、Igは強いですからね。以前のデータと同様の結果が出るか試してみてください。

(無題) 削除/引用 No.766-2 - 2008/03/03 (月) 04:06:09 - ねずみ 抗体にもよりますが、もしそれが一次抗体ならば、一日程度なら室温で放置していても大丈夫なことが多いです。抗体というのは、元来、生体内（３７℃程度）で常に循環しながら機能しているものですから、その抗体溶液にプロテアーゼでも混入していない限り、結構安定なものです。 しかし、その放置されたという抗体が、HRPなどの酵素が結合したような二次抗体ならば話は別です。室温で放置されている間にどんどん失活していってしまった可能性があります。 いずれにしても、一度その抗体を使って実験を行ってみることだと思います。そのときに、必ずうまくいくようなポシティブコントロールも同時に行うことが大切です。

抗体 削除/引用 No.766-1 - 2008/03/03 (月) 02:31:31 - 初心者 始めまして。 実験を始めたばかりで、失敗してしまいました。 不安になったので質問します。 この前、-20℃保存のwestern blotting用の抗体を室温に放置してしまいました。しかも１日半も。 こういった場合には、この抗体はもう使用できないのでしょうか？ 本当にくだらない質問で申し訳ありませんが、教えてください。

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