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検出液はどれくらい使えるのでしょうか？ 削除/引用 No.748-5 - 2008/03/06 (木) 20:51:45 - ささ ありがとうございます。 やっぱり発光は長時間続かないようですね。 ２次抗体からやり直したらバンドが検出できました。 ところで、ECLについてもう１点質問があります。 検出液も開封してから何ヶ月かたつと検出感度が落ちるものでしょうか？ 開封当初は現像するとバックで真っ黒になるということが多かったのですが、半年ぶりに使ってみたらバンドがなかなか検出できなくなっていたので、疑問に思い質問しました。 どなたかお答えいただければ幸いです。

advanceではないですが 削除/引用 No.748-4 - 2008/02/28 (木) 18:51:23 - proteoichiro 24時間持続するらしいECL plusでも やはりそんなには持続しません。 シグナルが強い場合は基質もそうですが、 抗体のHRPのほうもへたってきている感触なので、 私は二次抗体反応からやり直してます。

(無題) 削除/引用 No.748-3 - 2008/02/28 (木) 17:49:22 - 小児科医師（ゆとり教育） 私もECL Advanceを使用してwestern blottingを行っていますが、基本的には発光量はどんどん減少していくようです。１時間たつとほとんど検出されなくなってしまいます。私は一番最初に一番濃い現像（例えば感光時間が１０分）を行い、次に濃くなくてもよい現像（感光時間が３分）を行い、最後に薄いほうがよい現像（感光時間が１分）を行うという感じにしています。 あと、化学発光検出装置(例：LumiVisionPRO HSll(アイシン)）などが研究所の共通機器として使うことができればより簡便にかつ経済的に現像することができますね。研究所にそのような機械があるか調べてみるのも一興かと思います。

(無題) 削除/引用 No.748-2 - 2008/02/28 (木) 17:07:50 - ~ シグナルが強い場合には、1時間も持たないと考えています。 それ以上の場合は、もう一度溶液に浸け直しています。

ECL Advanceの発光持続時間 削除/引用 No.748-1 - 2008/02/27 (水) 22:08:20 - ささ ECL Advanceを使用してwestern blottingをしています。 ECL Advanceを使用されている方に伺いたいのですが、検出は発光開始から何時間ぐらいまで可能ですか？ 説明書には発光は４〜６時間持続するとあるのですが、どうもそんなに持続していないようなのです…。 一回検出した後、再度検出を試みると何も検出できなくなってしまいます。 ２回目の検出は発光開始から１時間〜時間半後に行っています。説明書通りならまだ発行している時間なので検出できるのではないかと思うのですが。

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