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(無題) 削除/引用 No.719-4 - 2008/02/22 (金) 20:08:14 - tao ありがとうございます！ 早速試してみます！

(無題) 削除/引用 No.719-3 - 2008/02/22 (金) 14:04:11 - てんてこ 　RNAが分解されていないか、電気泳動でチェックしてみては？ 　私の経験ですが、TRIzolでは抽出が成功してISOGENではRNAが分解（電気泳動でバンドが見えない）していた、マウスのサンプルでは成功したがヒトでは分解していた（TRIzolなら成功）、という不可解な事がありました。 　ISOGENでホモジナイスした後、一度遠心して上清を取り、これにクロロホルムを加えると上手くRNAが取れました（詳細はISOGENのマニュアルに載っています）。 　頑張ってください。

(無題) 削除/引用 No.719-2 - 2008/02/22 (金) 02:30:53 - ぽすど君 質問があまりに漠然とし過ぎなので，あまり回答得られないと思いますよ． BMMC以外はうまくいっているのか？ RNA抽出の具体的な手順は？ cDNA合成の具体的な手順は？ などなど．

ISOGEN法によるmRNA抽出 削除/引用 No.719-1 - 2008/02/21 (木) 23:26:07 - tao いつも参考にさせていただいています。 今回マウスの骨髄由来培養マスト細胞（BMMC）からmRNAを抽出しようとしているのですが、ニッポンジーンのISOGENを用いているのですが、あまり抽出率がよくありません。 また、cDNA合成を行って、GAPDHをプライマーに用いてPCRを行っているのですが、なぜかバンドの検出がうまくいきません。 どなたかなにかアドバイスをいただけないでしょうか？

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