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大腸菌を抗体で捕捉 トピック削除
No.702-TOPIC - 2008/02/19 (火) 17:27:59 - masa
全くのバイオ初心者です。
大腸菌(K12株)を抗体でガラス基板上に捕捉したいのですが
うまく抗体を固相化できません。
GeneTex社製のIgG(Polyclonal)をカバーガラスに滴下して数時間後
洗浄しても抗体も流されてしまうようです。
なるべく簡単に固相化するにはどうしたらいいのでしょうか?
漠然とした質問で申し訳ありません。
 
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(無題) 削除/引用
No.702-4 - 2008/02/21 (木) 13:11:50 - やまさき
まずは乾燥させてみてはいかがでしょうか?それでもノンコートのガラスは補足力はあまりない可能性はあります。

poly-lysinでもコートしていれば電気的な結合が生まれると思いますが、塩基性タンパなどでは無理かもしれません。一番簡単なのはNHS官能基のようなカップリング分子がついたプレートを買うことが、ELISAプレートなどではそんなことしなくても結構吸着するようですよ。

http://www.sumibe.co.jp/sumilon/elisa.html

(無題) 削除/引用
No.702-3 - 2008/02/20 (水) 09:40:21 - とおりすがり
使用経験があるわけではないのですが、
プロテインアレイ用の製品を使うのがいいんじゃないでしょうか?
いろいろなタイプがあるようですよ。
http://www.natureasia.com/japan-old/naturemethods/techfeature/pdf/protein/923Protein.pdf

ちなみにビアコアのセンサーチップはCMデキストランがコーティングしてありますね。

(無題) 削除/引用
No.702-2 - 2008/02/19 (火) 22:15:06 - BIA
なんだかBIACOREと似たような雰囲気がしますね。

やはりガラス表面に抗体を固定化するための細工が必要なようです。
http://www.biacore.com/jp/lifesciences/technology/154134/index.html
ここのFAQのところに、どのような処理が施されているか軽く書いてありました。

具体的な方法は分かりませんので、ご参考まで。

大腸菌を抗体で捕捉 削除/引用
No.702-1 - 2008/02/19 (火) 17:27:59 - masa
全くのバイオ初心者です。
大腸菌(K12株)を抗体でガラス基板上に捕捉したいのですが
うまく抗体を固相化できません。
GeneTex社製のIgG(Polyclonal)をカバーガラスに滴下して数時間後
洗浄しても抗体も流されてしまうようです。
なるべく簡単に固相化するにはどうしたらいいのでしょうか?
漠然とした質問で申し訳ありません。

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