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免染時の洗浄:TBSをPBSに換えたらいけない?
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No.65-TOPIC - 2007/08/15 (水) 09:20:06 -
ゆう
免疫染色を行うのに、洗浄用のTBSをきらしていたので急遽PBSに換えました。何も問題なく実験していた系だったんですが、光らなくなってしまいました。
これはPBSのせいなんでしょうか。
またTBSで実験すればいい話なんですが、気になったのでお尋ねしています。
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No.65-5 - 2007/08/15 (水) 17:58:26 -
ゆう
お答えをありがとうございました。
また実験してみます。
(無題)
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No.65-4 - 2007/08/15 (水) 13:51:38 - K
PBSでいける抗体が反応しなくなったのはバッファーではないようですね。
単純に抗体がへたってるとか、酵素がはがれたとか。
実験に直接大きな影響を与えるようなトラブルではないようですので、
暇なときに
いろいろなネガコン・ポジコンを試してみればよろしいかと思います。
(無題)
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No.65-3 - 2007/08/15 (水) 11:36:36 -
ゆう
二次抗体のバッファーは0.01M sodium phosphate, 0.25M NaCl,pH7.6とありましたが・・・。いかがでしょうか。
(無題)
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No.65-2 - 2007/08/15 (水) 10:27:55 - K
検出用抗体は何を使っていらっしゃるのでしょうか?
Alkaline Phosphatase conjugateだとPBSは使えません。
免染時の洗浄:TBSをPBSに換えたらいけない?
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No.65-1 - 2007/08/15 (水) 09:20:06 -
ゆう
免疫染色を行うのに、洗浄用のTBSをきらしていたので急遽PBSに換えました。何も問題なく実験していた系だったんですが、光らなくなってしまいました。
これはPBSのせいなんでしょうか。
またTBSで実験すればいい話なんですが、気になったのでお尋ねしています。
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