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pTRE-Tightについて トピック削除
No.573-TOPIC - 2007/11/28 (水) 11:03:12 - スターリングラード
tetracycline-inducibleの系をつくるためにClontechのexpresssion vectorであるpTRE-Tightに目的遺伝子をcloningしたあと、DH5αにtransformationしてからふやしてmini-prepさらにmidi-prep(Qiagen)でプラスミドをextractしましたがmini-prepの系で1μg前後、midi-prep（50mlでculture)の系で8μg前後しか得ることができません。sequenceなどですぐになくなってしまいます。
何かよい方法はありますか？やはりMaxi-prepでふやしエタ沈しないといけないのでしょうか。ご指導お願いいたします。
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　
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(無題) 削除/引用
No.573-2 - 2007/11/28 (水) 11:41:53 - 古老
似たようなトピックが古いフォーラムで何度かありました。例えば・・・
http://www.kenkyuu.net/cgi-biotech/biotechforum.cgi?start=1;mode=view;Code=3256

pTRE-Tightについて 削除/引用
No.573-1 - 2007/11/28 (水) 11:03:12 - スターリングラード
tetracycline-inducibleの系をつくるためにClontechのexpresssion vectorであるpTRE-Tightに目的遺伝子をcloningしたあと、DH5αにtransformationしてからふやしてmini-prepさらにmidi-prep(Qiagen)でプラスミドをextractしましたがmini-prepの系で1μg前後、midi-prep（50mlでculture)の系で8μg前後しか得ることができません。sequenceなどですぐになくなってしまいます。
何かよい方法はありますか？やはりMaxi-prepでふやしエタ沈しないといけないのでしょうか。ご指導お願いいたします。
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
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