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Trizol LSを使ったヒト血液サンプルからのRNA抽出 削除/引用 No.548-2 - 2007/11/28 (水) 21:17:33 - ふむふむ ベンダーに問い合わせたところ、 ヒト全血250 ulからの回収率は2.6-4.0 ugというデータが あるとのことでした。あれから、何度かRNA抽出を試みてい ますが、アガロースゲルチェックにて、かなりの高分子の 高さに、シャープなバンドがあり(いつも同じ位置)、ゲノム DNAのコンタミとは思うのですが、クロロフォルムで遠心分離 した水層からRNAを吸う際には、中間層を吸わないように細心 の注意を払っているつもりなのですが。。 どなたか、同様の経験とかないでしょうか。

Trizol LSを使ったヒト血液サンプルからのRNA抽出 削除/引用 No.548-1 - 2007/11/22 (木) 22:34:14 - ふむふむ お世話になります。インビトロジェンのTrizol LSを用いて ヒトの全血からトータルRNAを抽出していますが、収量がよく なく、また品質も低いです。A260/A280が1.7前後、A260/A230が 0.5程度です。NANODROPで濃度を測定していますが、グラフを 見てもタンパク質の混入があるようです。これまで、HeLa細胞 からは、Isogenを使って問題なく採れていたのですが、そもそも ヒト全血からのTrizol LSでどれくらいの収量があるものでしょうか。 経験のある方、ご教授しただけたら幸いです。 ちなみに、手順はマニュアルに従い、血液250μℓに対してLSを750μℓ 加え、−80℃に保存したものを使っています。保存期間は今回2週間 です。収量はこの1サンプルで、最終ペレットを水50μℓに溶かしたも のが200ng/μℓぐらいでした。1μg/μℓはあるかと思ったのですが。

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