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(無題) 削除/引用 No.542-7 - 2007/11/28 (水) 14:42:18 - 名無し 顕微鏡で見れば生きてるっぽいか、ゴミとか結晶っぽいか分かると思います。

(無題) 削除/引用 No.542-6 - 2007/11/27 (火) 15:27:43 - ~ 酵母とは違うどのような形状でしたか？ 容器に付着したかどうかよりも、こちらの方が原因究明に役立つ情報かと思います。 死んだ細胞の周りには何も見えないのでしょうか？ 血清の澱であれば、何らかの成分が沈殿しているだけなので、通常は細胞毒性は出ません。 直接澱が細胞の上に乗れば、ダメージはあるかもしれませんが、澱ごとディッシュに撒いても、特にHeLa細胞が死ぬということはありませんでした。 RPMI1640であれば、おきないと思いますが、 培地中の成分が濃いと、結晶化して容器表面に付着することはあります。 他の人の培地と見比べて、一目瞭然なほど色が濃いということはありませんよね？

(無題) 削除/引用 No.542-5 - 2007/11/27 (火) 11:51:20 - バイ 皆様、様々な意見をいただきありがとうございます。 〜さん mediumは私の書き間違えです。おっしゃるようにRPMI1640です。 Tさん 残念ながらリンク先のものとは形状が違うようでした。 つんさん コンタミの疑いも含め、現在mediumチェックを行っています。 もうひとつ不思議なのですが、このmediumを数日４℃に置いておいたところ、白いものは細胞のように容器の壁面に接着していました。ただの付着ではありません。 また、このmediumで細胞を飼うと細胞の成長は阻害され、接着細胞は剥がれていきます。白いものが血清成分であるとすると、細胞に悪影響を及ぼすことはあるのでしょうか。

(無題) 削除/引用 No.542-4 - 2007/11/22 (木) 16:38:14 - つん ＞ツヤがなく小さい何かが連なって存在しています。 連なって、というところが気になります。 血清を加えた培地中に白っぽい沈殿が生じることはよくありますが、連なっているもの見たことがありません。 コンタミなのでは？ その沈殿物が血清成分だった場合、~さまのおっしゃるように遠心やフィルターろ過で取り除くことはできます。 しかし、フィルターろ過した血清を用いると細胞の増殖が悪くなる場合があるそうですのでよく注意して観察しましょう（遠心については知りません）。

(無題) 削除/引用 No.542-3 - 2007/11/22 (木) 13:30:36 - Ｔ http://www.unc.edu/depts/tcf/yeast.htm このようなものではないですか？ だとすればイーストのコンタミです。 実験操作やクリーンベンチ・インキュベータの環境を見直しましょう。

(無題) 削除/引用 No.542-2 - 2007/11/22 (木) 12:41:09 - ~ RPMI1640についての質問で、RPMA1640という名前の特殊な培地についての質問ではありませんよね？ まずは、それがコンタミなのかを調べましょう ウシ血清中のタンパク質が凝集して沈殿している場合があります。 これは遠心やフィルトレーションで除くことが出来ます。沈殿がでることによる溶解成分の減少は仕方ありません。

medium中の白いものは何か 削除/引用 No.542-1 - 2007/11/22 (木) 11:26:20 - バイ 最近10%FBSを含むmediumに白いものができてしまいました。 白いものといっても、カビのまりものようなものではありません。 ツヤがなく小さい何かが連なって存在しています。 ２週間位前にも同じものができてしまい、血清もmediumも新しくしたのですが全く同じものです。 ちなみにmediumはRPMA1640です。 研究室で同じ血清を使ってる人にそういったことは起こってなく、血清のコンタミは考えにくいです。 これは何が原因と考えられるか、どなたか御存じの方いらっしゃったら教えてください。

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