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ryuさんへ 削除/引用 No.538-4 - 2007/11/21 (水) 19:05:00 - ゆう 回答ありがとうございます。 早速、ゲルに用いたものと同じバッファーで希釈して電気泳動したところ、 約800bpのバンドがうまく得られました。 バッファーの違いによる電気泳動への影響を改めて理解できました。 キットの操作の手違いではなかったということなので、安心しました。 ありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.538-2 - 2007/11/21 (水) 16:28:05 - ryu 以前にたような経験あります。 私には理由はわかりませんが、以下のようにしたら解決した経験あります。 精製したDNAを泳動する際にメスアップする溶液をTEではなく1xTAE(gelの組成と同じ)にして泳動してみる。 お試しください。 もっと優秀な方が理由を教えてくれるかも、、、。

ゲル抽出キットでバンドサイズが変化 削除/引用 No.538-1 - 2007/11/21 (水) 14:41:15 - ゆう こんにちは。 私は現在、約800kbのPCR産物をアガロースゲルから切り出し、QIAquick Gel Extraction Kit(キアゲン社)キットを用いて抽出・精製を行っています。 しかし、抽出・精製後のサンプルを電気泳動すると、約1000〜1100kbのバンドが現れてしまいます。 プロトコルに忠実に従うとともに、EQバッファーによる洗浄回数を増やしたり、電気泳動バッファーなどを毎回新しく変えてみたりしているのですが、一向に改善されません。 切り出し前のバンドサイズは正常で、マーカーも抽出・精製前後で同一のものを使用しています。 自分としても原因がわからないので、お分かりになる方がいらっしゃいましたら、回答お願いします。

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