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RT−PCR トピック削除
No.487-TOPIC - 2007/11/14 (水) 15:01:25 - promoter
逆転写PCRについての質問です。
mRNAの発現を確認する目的でRT-PCR、及び、ノーザンブロッティング等をおこないますが、酵母や大腸菌に、形質転換したプラスミドできちんとｍRNAが発現していることを確認する際に、どちらが正確に（もしくは容易に）確認することができるのでしょうか？プラスミドでのｍRNAの発現を確認する際、ノーザンのほうが良いと聞いたのですが、理由を教えてください。
平易な質問かもしれませんがよろしくお願いします。
　
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(無題) 削除/引用
No.487-2 - 2007/11/14 (水) 18:02:03 - a
状況が良く分からないので間違っているかもしれませんが、

RNA精製でDNaseI処理で確実にプラスミド由来のDNAを分解しておかないと、
mRNAの発現が無くてもPCRの時に元のプラスミドをテンプレートにPCRがかかるかもしれません。

酵母や大腸菌ならウエスタンで確認するような気がしますが、なにか特殊なことでもされているんですか？

RT−PCR 削除/引用
No.487-1 - 2007/11/14 (水) 15:01:25 - promoter
逆転写PCRについての質問です。
mRNAの発現を確認する目的でRT-PCR、及び、ノーザンブロッティング等をおこないますが、酵母や大腸菌に、形質転換したプラスミドできちんとｍRNAが発現していることを確認する際に、どちらが正確に（もしくは容易に）確認することができるのでしょうか？プラスミドでのｍRNAの発現を確認する際、ノーザンのほうが良いと聞いたのですが、理由を教えてください。
平易な質問かもしれませんがよろしくお願いします。
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