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二次抗体の再利用 トピック削除
No.440-TOPIC - 2007/11/02 (金) 23:12:48 - うえすちゃん
ウエスタン初心者です。
一次抗体は回収して再利用できることはよく知られており実際にできたのですが、二次抗体(HRP標識IgG)は再利用できるのでしょうか?一次抗体よりは安価ですがやっぱりもったいないので…。どなたか教えて下さい。
 
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(無題) 削除/引用
No.440-5 - 2007/11/04 (日) 14:36:42 - ~
1~2週間は使いまわしていましたが、
一次抗体にアクチンを使った後の二次抗体を使い回したら、
次のメンブレンでもアクチンが検出されたことがあります。

複数の一次抗体に使いまわす際には、十分に気をつけてください。

(無題) 削除/引用
No.440-4 - 2007/11/03 (土) 19:02:10 - a
抗体の活性が落ちてなくても、APやHRPの活性が落ちてると検出できませんよ
あと、前回使った1st抗体も混じっていると思いますから、ほどほどに。

(無題) 削除/引用
No.440-3 - 2007/11/03 (土) 18:49:15 - うえすちゃん
りょうさん

返信ありがとうございます。
余裕のあるサンプルのときにやってみます!

(無題) 削除/引用
No.440-2 - 2007/11/03 (土) 00:23:59 - りょう
やったことはないですが、可能でしょう。1次抗体より2次抗体の方が飽和状態で使用している気がします。なので再利用に耐えるでしょう。

でも大事なサンプルの検出にはフレッシュなものを使用するにこしたことないですね。

二次抗体の再利用 削除/引用
No.440-1 - 2007/11/02 (金) 23:12:48 - うえすちゃん
ウエスタン初心者です。
一次抗体は回収して再利用できることはよく知られており実際にできたのですが、二次抗体(HRP標識IgG)は再利用できるのでしょうか?一次抗体よりは安価ですがやっぱりもったいないので…。どなたか教えて下さい。

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