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一本鎖になったゲノムDNAは元には戻らない?
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No.439-TOPIC - 2007/11/02 (金) 12:12:51 - au使い
高等植物のゲノムDNAを間違えて90℃20分で熱処理してしまいました。
このDNAからインバースPCRやサザンを行いたいのですが、
ゲノムDNAが一度熱処され、一本鎖になると、たとえゆっくり冷ましても、
一本鎖内で二次構造を作ったり、相同性のある別の部位と二本鎖を形成するなどして、元通りの二本鎖には戻らないものなのでしょうか?
もし、二本鎖に戻らないとしたら、もとどおりの二本差に戻す良い方法はありますか?
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ありがとうございました。
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No.439-4 - 2007/11/16 (金) 11:37:11 - au使い
~ さん、おおさん、ありがとうございました。
やはり取り直すしかなさそうですね。
件のDNAはPCRに使うことにします。
(無題)
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No.439-3 - 2007/11/03 (土) 05:39:24 - おお
>もし、二本鎖に戻らないとしたら、もとどおりの二本差に戻す良い方法はありますか?
まず、厳密に2本鎖になったかどうかを確認する方法がありません。というか難しいと思います。
PCRになら使えるでしょうね。
(無題)
削除/引用
No.439-2 - 2007/11/02 (金) 14:32:41 - ~
取り直すのが一番早いです
サザンは無理でも、
PCRのテンプレートには使えるので、
それで何とかなりませんか?
一本鎖になったゲノムDNAは元には戻らない?
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No.439-1 - 2007/11/02 (金) 12:12:51 - au使い
高等植物のゲノムDNAを間違えて90℃20分で熱処理してしまいました。
このDNAからインバースPCRやサザンを行いたいのですが、
ゲノムDNAが一度熱処され、一本鎖になると、たとえゆっくり冷ましても、
一本鎖内で二次構造を作ったり、相同性のある別の部位と二本鎖を形成するなどして、元通りの二本鎖には戻らないものなのでしょうか?
もし、二本鎖に戻らないとしたら、もとどおりの二本差に戻す良い方法はありますか?
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