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(無題) 削除/引用 No.431-8 - 2007/11/20 (火) 10:58:45 - ９６A 用いるウィルスベクタープラスミドにもよると思いますが、ベクタープラスミド：VSVGプラスミド：gag-polプラスミドの比率が結構タイターに効いていました。条件をたくさん振ったわけではありませんが、私が使っているレンチウィルスベクターでは1:0.9:0.1が最も高タイターとなり、以来その比率でトランスフェクションしています。 また、これも一般的に言えることかわかりませんが、パッケージング細胞として293FTと293Tを比較したところ後者の方が5倍ほどタイターが高いという結果となりました。 ご参考までに。

(無題) 削除/引用 No.431-7 - 2007/11/03 (土) 14:31:50 - ウイルス 現時点で、タイター測定用の株化細胞とリンパ球（初代培養？）でのタイターはどれくらいなのですか？

(無題) 削除/引用 No.431-6 - 2007/11/03 (土) 11:23:10 - カエル ウィルスを濃縮する前の状態で確認できる程度のタイターが無ければ、たとえ濃縮したとしても高力価のウィルスは得られません。一度、GFPを発現するレンチウィルスを作成して、ウィルスが産生されていること確認された方が良いと思います。私も11kbのベクターに2kbのフラグメントを導入してレンチウィルスを作成しましたが、問題なくウィルスは産生されました。一度確認された方が良いてんとして、ウィルス産生用の細胞に問題が無いのかという点です。

(無題) 削除/引用 No.431-5 - 2007/11/02 (金) 12:32:17 - ばいきんマン 作業にもんだいはないと思われます。 おそらく、目的遺伝子に問題なのでは？とおもっていますが、ベクターのサイズが大きいためではないかと思っています。

(無題) 削除/引用 No.431-4 - 2007/11/01 (木) 14:35:03 - クローニング LacZではうまく行っているのか、目的遺伝子に限ってうまくいかないのかがわかりません。 ウイルス産生までの作業にはまちがいはないいのでしょうか。

(無題) 削除/引用 No.431-3 - 2007/11/01 (木) 12:07:41 - ばいきんマン トランスフェクションはかなりの効率でされています。 その点は大丈夫です。

(無題) 削除/引用 No.431-2 - 2007/11/01 (木) 10:46:52 - ああ ウイルスをつくるときのトランスフェクションは大丈夫ですか？？１００％導入されていますか？？

レンチウイルス感染 削除/引用 No.431-1 - 2007/11/01 (木) 09:57:53 - ばいきんマン 高タイターなウイルス（VSV-G）を作製したいのですが、なかなかうまくいきません。レンチウイルスのベクターが13kbpと大きいのも問題なのではとおもっていますが…。 6500ｇ/24hでの濃縮をおこなっていますがなかなか高タイターが得られません。sucroseやpoly-L-lysineを加えた濃縮もおこなってみようかと思っています。 他にタイターを上げる方法などありませんでしょうか？ また、効率の良い感染方法などもあったら教えてください。 感染させる細胞は、humanリンパ球です。

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