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(無題) 削除/引用 No.429-4 - 2007/11/12 (月) 20:01:39 - 名無し protein A beads　(ウサギ抗体）かprotein G beads (ウサギ、ラット、またはマウス抗体）をつかって抗体を一旦くっつけて、少量の溶出液で溶出することで、濃縮できると思います。イオン交換や硫安沈殿など蛋白質を痛めない方法で濃縮することも出来ると思います。

(無題) 削除/引用 No.429-3 - 2007/11/01 (木) 23:23:44 - FAS A さん、ご返事ありがとうございます。 早速メーカーに問い合わせてみましたところ、”濃縮方法は教えることはできない”という返事でした。ちなみに、私の様な問い合わせはよくあるそうです。 A さんのおっしゃるように、濃縮にあたっては考慮すべきファクターが多く且つ、カラムなどの購入も新たに必要のようなので、ここは購入という事にしようと思います。 いろいろとありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.429-2 - 2007/10/31 (水) 21:40:01 - A まずはメーカーに連絡をとって確認するべきでしょう。 ただ抗体といっても蛋白質ですから普通濃縮は可能でしょうね。 手持ちの抗体は体積が少ないでしょうからAmiconから出ている Microconを使うことになるのでは（カタログによると5uLまで 濃縮可能）。ただ抗体によってはグリセロールが入っていたり しますから直接濃縮してバッファー交換を行おうとすると時間が かかるかもしれません。 出来ればまず透析してから濃縮にもって行きたいところです。 エッペンチューブをうまく使えば50uLぐらいまでの透析が 可能ですから。もちろん透析・濃縮は保存液の状態が 変わってしまいますからすぐに使い切る必要があるかも しれません。

市販の抗体は濃縮して使用可能？ 削除/引用 No.429-1 - 2007/10/31 (水) 21:09:16 - FAS EMSAでsupershift assayを行う予定です。 EMSAやChIP用の高濃度の抗体が必要なのは承知なのですが、今ラボにあるのは市販の（Santa）Western用の抗体（高濃度の10倍希釈）ですが、これをどうにかして濃縮してEMSAのsupershift assayに使えないものかと思い質問しました。 もちろんEMSA用の高濃度の抗体をさっさと買えば済む事なのですが、実験の都合上、他にも高価な買いものがあるので躊躇しています。 どなたか、ご教授頂けないでしょうか？

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