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PCRマシンおそろしや 削除/引用 No.427-10 - 2007/11/15 (木) 20:33:31 - まあ あるPCRマシンで、genotypingとかで見かけ上問題なく使えていたのでRT-PCRでｃDNA取りをしようとしたら全然うまくいかず、いろいろ調べたら、液量が増えるととたんに温度が変動しにくくなることが判明しました。(端っこではさらにダメ。)機械が、安物のノンブランドのせいか、チューブを囲うところだけが金属で、裏から機械を見るとスカスカなのです。金属の温度上昇が調節されていても、これではトルクがわるいというか、ダメダメですよね。液量に対する補正もかけられないし、こんなものをPCRと称して売るな、と思っていたら、最近PCRという名前ではないのに、PCRとして使えますと言ってうっている、、、。皆さん気をつけましょうね。

(無題) 削除/引用 No.427-9 - 2007/11/01 (木) 12:46:03 - あれい PCRは皆様がおっしゃるとおりちょっと条件が変わることで結構結果が随分と変わると思います。 チューブ、酵素、Buffer、機会、水、sample、Primerの質などなど。 よって、論文どおりの配列でも自分で行う場合は自分で細かく条件設定の最適化を行う必要があると思います。

(無題) 削除/引用 No.427-8 - 2007/11/01 (木) 12:27:17 - ぽー ＞あうさん 同じ会社の酵素、プライマーなどを使っていても、 ＰＣＲの機械の違いで変わってくることもありますよ。 同じプレmixから分注したサンプルだけ違うものをＰＣＲしても、 機械が違えば変なバンドが出てしまうってことを何度か経験したことがあります。 ＰＣＲの機械によって温度の上下速度が微妙に違うのが影響してるんだと聞いたことがあります

(無題) 削除/引用 No.427-7 - 2007/11/01 (木) 11:37:46 - さとし ちょっと高いけど納期が早い（翌日午前）インビトロジェン使っています。 グライナーが安くて早い（翌日午後）のでまわりで乗り換えた人もいますが 普通に使えているようです。 （納期は東京区内の話です） ＞あうさん それは、オリゴ以前にPCR試薬と酵素の問題から疑ってみてはいかがでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.427-6 - 2007/11/01 (木) 10:55:23 - あう スレにあったH社を使っています。 論文に載っているものと全く同じものを注文して同じPCRサイクルで行ってますが 論文の写真とは違い、バンドが何本も出たり、検出バンドが出なかったりします。 質問の内容とは趣旨がずれますが論文のものを全面的に信頼しないほうがよいのでしょうか？

それでは 削除/引用 No.427-5 - 2007/11/01 (木) 00:00:30 - TS みなさん、情報ありがとうございます。 日本遺伝子研究所に発注しようかと思います。 また何かあればよろしくお願いします。

(無題) 削除/引用 No.427-4 - 2007/10/31 (水) 19:29:23 - user 何社も使ってみましたが、再合成が多いところは困りますね。 厳密にチェックやってるからとかいわれても、今は大抵はそうだし。 せいさんのあげられた日本遺伝子はその点、 相当長いものでも再合成がほとんどなく、早くて融通が利くし、品質に関しても問題は特にないです、今のところは。 お値段は、交渉次第でしょう。

(無題) 削除/引用 No.427-3 - 2007/10/31 (水) 12:28:22 - NH 北海道システムサイエンス 30merくらいなら問題ないです。

(無題) 削除/引用 No.427-2 - 2007/10/30 (火) 22:45:56 - せい 日本遺伝子研究所

DNAオリゴ注文業者 削除/引用 No.427-1 - 2007/10/30 (火) 21:36:19 - TS バイオテクのトピックではなくて恐縮ですが、お願いします。 日本国内で、PCR用のプライマーを注文するおすすめの業者を教えてもらえないでしょうか？安くて、納期が早いところが良いです（質が明らかに悪いところは論外ですが）。 Invitrogenやsigma genosisなどの大手はわかるのですが、やはり高いんですよね？ アメリカでは、IDTと言うところを使っていたのですが、そのくらい安いと良いんですけど。 よろしくお願いします。

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