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(無題) 削除/引用 No.361-4 - 2007/10/25 (木) 00:59:47 - C > 凍結乾燥後、再溶解。 > バキュームで液を飛ばして液量を減らす。 > これらはいずれも塩濃度など濃くなってしまいますが。 目的の蛋白質が弱いバッファー溶液中でも安定で凍結乾燥 可能であれば、例えば最終的に濃縮後1xPBSとして調整したい のであれば例えば 1.0.25xPBSで透析 2.凍結乾燥 3.1/4体積のDWで再溶解 とすれば塩濃度など問題なく4倍に濃縮できます。 稀にですがDW中でも安定な蛋白質であればDWで透析後 凍結乾燥すれば更に濃縮可能です。 もちろんこの当たりの方法を使うのであれば少量のサンプルを 使って予備実験を行ってください。

(無題) 削除/引用 No.361-3 - 2007/10/23 (火) 18:00:47 - Winter8 硫安沈殿後、少量で溶解しPD-10などの脱塩カラムに流す。 これでそこそこの濃度にはなると思うのですが、どのぐらいの濃度に濃縮したいのですか？

(無題) 削除/引用 No.361-2 - 2007/10/23 (火) 15:27:29 - taka 凍結乾燥後、再溶解。 バキュームで液を飛ばして液量を減らす。 これらはいずれも塩濃度など濃くなってしまいますが。 TCA沈殿などを利用する。これは蛋白変性や不溶化の危険性がありますが。 蛋白量・液量が十分あるなら、イオン交換やアフィ二ティー樹脂・疎水樹脂など利用可能なカラムにトラップさせ、少量の溶出液で溶出する。

タンパク質濃縮 削除/引用 No.361-1 - 2007/10/21 (日) 00:37:51 - chipoohsan 精製後のタンパク質を濃縮する際、マイクロコンやアミコンウルトラを用いていますが、濃縮されず、大半膜にくっついてしまうようです。 このような場合、どうやって濃縮したらよいのでしょうか。

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