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(無題) 削除/引用 No.353-3 - 2007/10/25 (木) 10:30:07 - ｔａｋ ＰＩ染色で同様の解析を予定しております。 初心者なのですが、ＲＮａｓｅを熱処理しないといけないのですか？

FACSサンプル調製 削除/引用 No.353-2 - 2007/10/24 (水) 21:27:30 - YOU 　私自身は、固定後のサンプルは-20度で置いています。-20度の方が良いというのを本でも見たことがあります。（自身、4度で置いたことがないので比較は分かりませんが。）さらに言うと、調製の時点で、細胞のPBS懸濁液に-20度で置いておいたエタノールを加えています。 　また、ろ過と言うのは細胞塊を除くと言うことでしょうか？その解釈で良いとすれば、細胞を直接70%エタノールで懸濁すると、細胞の凝集塊はもう十分に懸濁出来ないので、まずPBSできちんと懸濁させた後、70%となる量の冷エタノールを加えると良いようです。（すでにそうされていたら、すいません。その場合は、ろ過の必要はない状態のサンプルが出来ていると思います。） 　RNaseの調製は、95度で15分の処理をしています。その後は適当に室温で冷ましていますが、こちらはこれで正しいのかちょっと自信ないです。

FACS 細胞の固定や処理 削除/引用 No.353-1 - 2007/10/18 (木) 17:17:48 - うえすたんたん 培養細胞でcell cycle解析予定です。 70％エタノール固定後のサンプルは保存は4度？　−20度？どちらがいいですか。保存する場合、濾過してから保存したほうがいいのでしょうか。 また前もってRNaseを熱処理するとき、何分くらい沸騰させればいいですか。そして沸騰後は急冷か室温で冷ますか、を教えてください。

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