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(無題) 削除/引用 No.331-2 - 2007/10/13 (土) 12:34:39 - K BCAにおいて得られたタンパク量はバックグラウンドを差し引きましたか？つまり、蛋白質を溶解している溶液のみを計測して、それを試料の濃度から差し引くのです。バックグラウンドが低ければ、その濃度で正解と考えていいかと思います。 > �@ほかのassayで使えるものがあるでしょうか。ありましたら製品名も教えていただければ幸いです。 Bradford法が使えると思います。 > �Aまた、他の方法としてタンパクを一度沈殿させてから、assayに影響を与えず且つ可溶化状態を維持できる試薬で溶かしてから、再度BCA assayで測定することも考えていますが、タンパクを沈殿させる方法として代表的な方法を教えてください。たとえばトリクロロ酢酸、アセトンなどでしょうか。 書かれている通りです。他にもいくつか方法はありますが、まずはその2種類のうちどちらかで試されてはいかがでしょうか。

タンパクの濃度測定法 削除/引用 No.331-1 - 2007/10/13 (土) 10:27:17 - スターリングラード 基本的なことで申し訳ありません。 Urea 1M, NaCl 500mM, phosphate buffer 20mMのsolutionに可溶化しているタンパクの濃度を測りたいのですが、BCA assay(PIERCE)では発色反応に問題が生じます。（色が紫色ではなく少し青みがかったような色になります。測定値：0.625μg/μl はponceauのbandの濃さから考慮すると妥当な値なのですが自信がもてません。BCA assayにおける各試薬の許容濃度は超えてはいません。） 　伺いたい点は �@ほかのassayで使えるものがあるでしょうか。ありましたら製品名も教えていただければ幸いです。 �Aまた、他の方法としてタンパクを一度沈殿させてから、assayに影響を与えず且つ可溶化状態を維持できる試薬で溶かしてから、再度BCA assayで測定することも考えていますが、タンパクを沈殿させる方法として代表的な方法を教えてください。たとえばトリクロロ酢酸、アセトンなどでしょうか。 　　　　宜しくお願いいたします。

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