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フェノール・クロロホルム抽出時の中間層
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No.330-TOPIC - 2007/10/13 (土) 03:50:43 - sodium chloride
フェノクロ処理をするとinterphaseにものすごく体積の大きい白いモノができることがあります。変性したタンパクだと思うのですが、サンプルによってできたり、できなかったりなので定量性に欠けて非常に困ってます。(同じサンプルでも時によっては出たり、でなかったり)。
フェノール:クロロホルム=1:1です。
(サンプル100 ulにフェノール50 ul,クロロホルム50 ul加えてやってます)
何か良い解決方法ございましたら、教えてください。
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No.330-2 - 2007/10/14 (日) 17:21:23 - 中年
サンプルは何ですか?
中間層の容量が大きいのは遠心が不十分であるせいかもしれません。そう言う場合は、チップをフェノクロ層に突っ込んでこれををなるべく除き、中間層+水層を残して再度、遠心をすると中間層の容量をぐっと減らせることがあります。
フェノール・クロロホルム抽出時の中間層
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No.330-1 - 2007/10/13 (土) 03:50:43 - sodium chloride
フェノクロ処理をするとinterphaseにものすごく体積の大きい白いモノができることがあります。変性したタンパクだと思うのですが、サンプルによってできたり、できなかったりなので定量性に欠けて非常に困ってます。(同じサンプルでも時によっては出たり、でなかったり)。
フェノール:クロロホルム=1:1です。
(サンプル100 ulにフェノール50 ul,クロロホルム50 ul加えてやってます)
何か良い解決方法ございましたら、教えてください。
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