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FACS 細胞周期解析で トピック削除
No.313-TOPIC - 2007/10/10 (水) 13:35:58 - うえすたんたん
ヒト腫瘍細胞株でFACSする際、成書にると@70％エタノール固定、ARNAse添加とありますが、この@Aは必須のステップでしょうか。（かなり結果を左右するのでしょうか）　PI染色やる予定です。
　
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(無題) 削除/引用
No.313-3 - 2007/10/10 (水) 16:40:23 - FACSさいこう
まれに、未固定で
細胞周期を見ている論文がありますが、
その場合には0.1%NP40などで細胞膜を
破壊して、RNaseとPIを作用させてからやってました。

　その場合には回収してすぐに、FACSに
かけないといけないので、あ、さんのおっしゃるように
70%エタノールで固定したほうが、楽だと思います。

(無題) 削除/引用
No.313-2 - 2007/10/10 (水) 14:27:45 - あ
@エタノール固定のステップでは、細胞をすかすかにしてPIが細胞内に入るようにする
ARNase処理はRNAを分解して、RNAがPIで染まらないようにする
このため両ステップとも必須です。

FACS 細胞周期解析で 削除/引用
No.313-1 - 2007/10/10 (水) 13:35:58 - うえすたんたん
ヒト腫瘍細胞株でFACSする際、成書にると@70％エタノール固定、ARNAse添加とありますが、この@Aは必須のステップでしょうか。（かなり結果を左右するのでしょうか）　PI染色やる予定です。
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