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実験場所を変えたら免染がうまくいかなくなった トピック削除
No.28-TOPIC - 2007/08/03 (金) 12:03:34 - ｍ
ヒトの絨毛組織を使って免染を行っています。
マクロファージやIndoleamine 2,3dioxygenaseの蛍光染色を行っていますが、以前はうまくいっていたのに、今回実験場所を変えたところ、
光らなくなってしまいました。
洗浄に使うTBSをPBSに変え、蛍光の二次抗体をCy3からFITCに変えた（同じ会社の試薬）以外は、手順や試薬は変えていません。
PBSに変えたのがいけないのでしょうか。
こういう経験をされた方がいらっしゃったら、アドバイスをいただけると
幸いです。よろしくお願いします。
　
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(無題) 削除/引用
No.28-4 - 2007/08/13 (月) 14:30:48 - ｍ
そうですね。全く同じ試薬を使って再度実験してみます。
ありがとうございます。

フィルターは換えて観察したのですが・・・。
再度確認します。

まさか 削除/引用
No.28-3 - 2007/08/03 (金) 14:14:27 - poink
同じフィルターで観察しているってことは無いですね？

(無題) 削除/引用
No.28-2 - 2007/08/03 (金) 12:23:44 - ~
2つも試薬を変えたのに、
場所が原因だと考える理由は何ですか？

まずは、その試薬で前の場所で実験してみるか、
今の場所で前の試薬を使って実験しましょう。

実験場所を変えたら免染がうまくいかなくなった 削除/引用
No.28-1 - 2007/08/03 (金) 12:03:34 - ｍ
ヒトの絨毛組織を使って免染を行っています。
マクロファージやIndoleamine 2,3dioxygenaseの蛍光染色を行っていますが、以前はうまくいっていたのに、今回実験場所を変えたところ、
光らなくなってしまいました。
洗浄に使うTBSをPBSに変え、蛍光の二次抗体をCy3からFITCに変えた（同じ会社の試薬）以外は、手順や試薬は変えていません。
PBSに変えたのがいけないのでしょうか。
こういう経験をされた方がいらっしゃったら、アドバイスをいただけると
幸いです。よろしくお願いします。
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