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(無題) 削除/引用 No.2745-3 - 2009/01/28 (水) 11:15:51 - EcoRI 18度でも大丈夫なようです。 以前、条件検討で行ったことがありますが、誘導はされるようです。 前培養を前日に行って、当日(２００倍ぐらいの)ラージスケールの培養に全量を移して37度で培養して、 OD600が0.4-0.5になったら、18度の水浴にしばらくつけ込んでから、 18度で培養するといいと思います。 さしでがましいようですが、吸光度のモニターはきちんと行うべきです。 結構クリティカルに誘導量に響いてくるようです。

(無題) 削除/引用 No.2745-2 - 2009/01/28 (水) 07:01:05 - あかね インキュベーターを一時的にコールドルームに移しては動ですか？

pCOLDベクター 削除/引用 No.2745-1 - 2009/01/28 (水) 00:09:58 - TAKARAJIMA いつもお世話になっております。 TAKARA pCOLDベクターについてご存知の方がいらっしゃったらご教授いただきたいと思いトピを立てさせていただきました。 現在、pETベクターを用いてバクテリアのproteaseのリコンビナントの作成を試みています。 しかし、それ自体多量に産生されると自己分解してしまう酵素のため培養条件、誘導条件を検討しましたが、発現量がきわめて少なく実験が止まっています。 pCOLDベクターのマニュアルを読むとIPTG添加後、15度で培養となっているのですが、これは例えば１５度よりも少し上、１８度あたりでも可能でしょうか？ というのは、私たちのラボでは、低温で培養する培養システムがないので何とかがんばって１８度くらいです。ベクターを購入する前に、経験のある先生方がいらっしゃったらコメントいただければ幸いです。 よろしくお願いします。

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