全7件 ( 1 〜 7 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用 No.2707-7 - 2009/02/04 (水) 17:40:17 - あきひろ 返事が遅くなりました。 今回は、ヒストンの濃度を300ng/ulにまで上げ、さらにeppendorf社のprotein lobind tubeを用いてみましたところ、壁への吸着は無視できるようになりました。 とりあえずこの条件で進めていこうと思います。 アドバイスありがとうございました。

親水性の低吸着チューブ 削除/引用 No.2707-6 - 2009/01/26 (月) 00:21:24 - K シリコン化のように壁面を疎水性にコーティングした場合、 壁面の面積の分だけ蛋白質が吸着していきます。 （疎水性にして水切れをよくしているだけ） そのような場合、親水性コーティングのほうが低吸着性になるようです。 会社の回し者ではありませんが、プロテオセーブとか。 この商品を使ったことがありますが、それでも吸着します。（水切れが悪くなるのも一因） 完璧に吸着をブロックするものはない、と理解していますが、 APさん、名無しさんが書かれている方法は効果ありでした。 改善できたら、ぜひ結果を教えてください。

(無題) 削除/引用 No.2707-5 - 2009/01/23 (金) 01:51:38 - 名無し ヒストンのプラスチャージが悪さしてるなら塩たせばばどう？それかCHAPSみたいな両イオン性界面活性剤とか。チャージの問題だとNP-40はいくらいれても効かないでしょう。

(無題) 削除/引用 No.2707-4 - 2009/01/22 (木) 23:49:32 - ザンギ 塩基性たんぱくは、シリコナイズすると吸着が増えるんじゃなかったかなぁ。 エッペンドルフ社等から低吸着タイプのチューブが出てたと思います。

(無題) 削除/引用 No.2707-3 - 2009/01/22 (木) 23:28:21 - AP ヒストンを扱ったことはないですが、 どんなタンパク質試料（あるいは核酸）であっても吸着性はあります。ヒストンは非常に強い正電荷を持っているので、吸着しやすそうですね。 シリコナイズは一つの方法ですが、昔から（ガラスピペットが主流だったかろから）行われている方法はあらかじめ、適当なタンパク質溶液（唾液を使うというのもあったようです）を通してブロッキングすることです。 反応系に干渉しないタンパク質である必要がありますが、この場合、例えばBASやヘパリン溶液などが使えるかもしれません。あるいは、ヒストンの試料がたくさんあるなら、一部をブロッキング用に使うとか。

(無題) 削除/引用 No.2707-2 - 2009/01/22 (木) 23:11:40 - A シリコナイズ済みのチューブが販売されていますから 出入りの業者さんからサンプルを貰って試してみては？

ヒストンがエッペンにくっついてしまいます！ 削除/引用 No.2707-1 - 2009/01/22 (木) 22:38:08 - あきひろ ヒストン修飾に関する実験を行っています。 ヒストンを修飾酵素と反応させているのですが、ヒストンがエッペンに吸着してしまい困っています。 ヒストンの濃度は70ng/ulで3% NP40が入っていますが、ほぼ全てがエッペンに吸着しているようです。 何か対処法をご存知の方がおられたらよろしくお願いいたします。

全7件 ( 1 〜 7 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

---